Аннотация:Рак эндометрия (РЭ) является четвертым по распространенности злокачественным новообразованием среди женского населения во всем мире. Поиск новых мишеней, отвечающих за устойчивость опухоли к терапии, метастазирование и рецидивирование остаётся актуальной проблемой здравоохранения. Однимиз перспективных направлений поиска является исследование свойств опухолевых стволовых клеток (ОСК). Имеющиеся на настоящий момент данные об экспрессии маркеров ОСК при РЭ и способности ОСК РЭ к образованию сфероидов носят фрагментарный характер. В частности,неизвестно, как связано количество ОСК со степенью дифференцировки опухоли.Цель исследования. Исследование связи показателей частоты сфероидообразования и экспрессии маркера ОСК CD133 в смешанных первичных культурах РЭ со степенью дифференцировки опухоли при РЭ.Материалы и Методы. Опухолевый материал РЭ получали после оперативного вмешательства в отделении гинекологии ФГБУ «НМИЦ онкологии» Минздрава России. Дезагрегацию образца проводили в растворе Хэнкса (Биолот,Россия), содержащем коллагеназу IV (Gibco,США), затем первичные культуры инкубировали в среде DMEM (Биолот, Россия), содержащей 10% ФБС (Биолот, Россия) и 1% гентамицина. Для определения способности клеток к сфероидообразованию в 6-луночный планшет высевали по 2,0*104 кл/лунку в среду DMEM, содержащую 0,35% агарозы и факторы роста EGF (20 нг/мл) и FGF (20 нг/мл). По истечении 14 дней культивирования определяли количество сфероидов, размер и частоту их образования. Кроме того, было проведено иммунофлуоресцентное окрашивание двумерных культур РЭ на маркер CD133 (ab19898, Abcam, США) с определение частоты встречаемости CD133+ клеток.Результаты. Из 9 полученных первичных культур РЭ спустя две недели культивированияв мягкой агарозе в 5 случаях было зарегистрировано образование крупных клеточных сфероидов (средний диаметр 98-110 мкм). Во всех культурах наибольшую связь со сфероидообразованием показали небольшие полигональные CD133+ клетки. Наименьшая частота сфероидообразования (0,5%), а также частота CD133+ клеток (0,8%) наблюдалась в культуре, полученной из высокодифференцированной опухоли G1. Максимальное количество CD133+ клеток (11,2-52,2%) и сфероидов (1,8-5,7%) образовывали культуры, полученные из умеренно дифференцированных опухолей (G2). В культуре, полученной из низкодифференцированной опухоли(G3), данные параметры демонстрировали промежуточные значения: частота CD133+ клеток составила 4,8%, а частота сфероидообразования- 1,5%. Однако из опухоли G3 были получены сфероиды с максимальным диаметром (180-150 мкм).Заключение. Количество клеток с фенотипом ОСК в РЭ продемонстрировало нелинейную связь со степенью дифференцировки опухоли. Вероятно, это связано с тем, что первичные культуры РЭ включают в себя не только клетки опухоли, но и клетки микроокружения, а также нормальные стволовые клетки, эспрессирующие СD133, и обладающие способностью к сфероидообразованию в мягком агаре. Требуются дополнительные исследования парных образцов первичных культур опухоли и нормального эндометрия для изучения связи между наблюдаемым фенотипическим разнообразием клеток в культуре и их способностью к сфероидообразованию.Ключевые слова: рак эндометрия, первичная культура, опухолевые стволовые клетки,сфероиды.