Исследование антиоксидантного статуса и количества двунитевых разрывов ДНК на моделях опухолевого поражения головного мозга метастазами немелкоклеточного рака легкого in vivoстатья
Статья опубликована в журнале из списка RSCI Web of Science
Аннотация:Цель исследования. Оценка антиоксидантного статуса и степени повреждения ДНК в тканях подкожных ксенографтов немелкоклеточного рака легкого и перитуморальной зоны, созданных с использованием клеточных линий А549 и Н1299.Материалы и методы. Исследование проводили на 35 интактных иммунодефицитных самцах мышей линии Balb/c Nude. В качестве трансплантируемого опухолевого биоматериала использовались клеточные линии A549 и H1299. Процедуру создания CDX-модели проводили в соответствии с протоколом для супратенториальных инъекций (Ozawa T., James C. D., 2010), адаптированным для данного эксперимента. Контроль темпов роста и визуализацию интракраниальных ксенографтов проводили с помощью системы для микро-КТ в высоком разрешении. Определение активности каталазы и супероксиддисмутазы проводили с помощью электрофореза в неденатурирующих условиях в 8 % и 12 % полиакриламидном геле. Концентрацию сульфгидрильных групп определяли по Эллману. Уровень повреждения ДНК в лимфоцитах определяли методом ДНК-комет.Результаты. В результате эксперимента были получены модели опухолевого поражения головного мозга, в 100 % характеризующиеся интракраниальным характером роста. Установлено, что активность каталазы в исследуемых лизатах интракраниальных ксенографтов, ткани перитуморальной зоны и условно здоровой ткани животных–опухоленосителей во всех опытных группах статистически значимо увеличивалась относительно условно-здоровой ткани интактных животных, причем наибольшие отличия от контроля были зарегистрированы в группе животных, которым имплантировали культуру Н1299 в концентрации 1 × 106 . Активность супероксиддисмутазы в исследуемых лизатах интракраниальных ксенографтов и ткани перитуморальной зоны статистически значимо увеличивалась относительно контрольного образца во всех опытных группах. Наиболее выраженное увеличение активности СОД наблюдалось в ткани интракраниальных ксенографтов с наибольшей опухолевой нагрузкой, что составило 28,8 % и 32,9 % изменений относительно контрольного образца. Выявлено статистически значимое увеличение концентрации SH-групп относительно контрольного образца в лизатах опухолевой ткани во всех экспериментальных группах, причем наибольшая концентрация наблюдалась в группе экспериментальных животных с наибольшей опухолевой нагрузкой составила 36,2 ± 0,47. Установлено, что% изменений показателя «tail moment» (показатель степени повреждения ДНК) в группах О1, О2, О3 и О4 статистически значимо увеличивался относительно контрольного образца на 55,8 %, 111,8 %, 97,3 % и 170 %, соответственно.Заключение. Наблюдаемое повышение активности системы антиоксидантной защиты, накопление окислительных модификаций белков, а также увеличение двунитевых разрывов ДНК в тканях интракраниальных ксенографтов немелкоклеточного рака легкого in vivo позволяет говорить о том, что созданные модели отражают процессы, сходные с таковыми в опухолях немелкоклеточного рака легкого человека.