Получение и характеристика мутантов пенициллинацилазы из Escherichia coli, способных использовать производные жирных кислот в качестве ацильных доноровдипломная работа (Специалист)
Аннотация:В соответствии с результатами молекулярного моделирования получены каталитически активные мутанты пенициллинацилазы с расширенной субстратной специфичностью и ожидаемой активностью по отношению к производным жирных кислот. На основе жирных кислот синтезированы хромогенные субстраты для изучения каталитических свойств полученных мутантов. Обнаружен эффект индукции новой каталитической активности с длительным лаг-периодом как в мутантных формах, так и в ферменте дикого типа, проведена регистрация интегральной кинетики. Проведен анализ возможных кинетических механизмов и предложена кинетическая модель для описания обнаруженного явления, основанная на медленном формировании каталитически компетентной формы фермента при связывании субстрата и протекании реакции.