ИСТИНА

Основная догма молекулярной биологии постулировала, что в эукариотических клетках один ген кодирует один белок, однако развитие методов геномного, транскриптомного и протеомного анализа позволило расширить границы кодирующего и регуляторного потенциала генома. Определение функциональных малых открытых рамок считывания (ОРС), состоящих менее чем из 100 кодонов, представляет собой серьёзную научную проблему. Анализ распределения рибосом в РНК эукариотических клеток выявил накопление транслирующих рибосом в областях, ранее считавшихся некодирующими. Например, 5'-нетранслируемые области (5'-НТО) многих мРНК накапливают рибосомы, т.е. могут содержать расположенные выше ОРС. Расположенные выше ОРС могут регулировать трансляцию в цис-положении, а также кодировать небольшие функциональные белки (микропротеины). Мы использовали библиотеку лентивирусных частиц для подавления работы 977 малых рамок считывания, отобранных на основе анализа данных профилирования рибосом с помощью системы редактирования генома CRISPR/Cas9 для поиска участков, участвующих в поддержании клеточной пролиферации. Изучение механизмов работы некоторых мишеней, выявленных в ходе скрининга, поможет определить их роль в жизни клетки.