Аннотация:Белки оболочки вируса гепатита С (ВГС) E1 и E2, являясь компонентами вириона, участву-
ют в формировании инфекционных частиц вируса в зараженной клетке. Детальное строение частицы
ВГС остается малоизученным, причем наименее изучен процесс сборки вирионов и их выход из клетки.
Предполагается, что свойства вириона зависят от гликозилирования белковой оболочки вируса в клетке,
а гликаны в некоторых сайтах гликозилирования этих белков важны для их функционирования и про-
хождения жизненного цикла ВГС. N-гликаны гликопротеинов могут влиять на формирование вирусных
частиц, связывание вируса с клеткой и патогенез гепатита С. Мы изучили влияние гликанов на сворачи-
вание гликопротеина Е2, образование функциональных гликопротеиновых комплексов и формирование
вирусных частиц в клетках насекомых и млекопитающих. С этой целью в сайты N-гликозилирования Е2
вируса гепатита С (генотип 1б штамм 274933RU) вводили точечные мутации и анализировали мутантные
белки в бакуловирусной системе экспрессии. Удаление единичных сайтов гликозилирования гликопроте-
ина Е2, за исключением сайта N6, не сказывалось на эффективности его синтеза в клетках насекомых Sf9,
а электрофоретическая подвижность мутантных белков возрастала пропорционально снижению числа сай-
тов гликозилирования. В отличие от клеток Sf9, уровень синтеза гликопротеина Е2 ВГС в клетках Hek293T
человека зависел от присутствия гликанов в сайтах гликозилирования N1 и N8. В то же время удаление
гликанов в сайтах N1, N2 и N10 приводило к накоплению непродуктивных димеров Е1Е2 в виде агрегатов
и подавлению продуктивной сборки вирусоподобных частиц как в клетках насекомых, так и в клетках
млекопитающих. Удаление единичных сайтов гликозилирования Е2 ВГС не влияло на синтез РНК струк-
турных белков и образование вирусоподобных частиц в клетках насекомых и млекопитающих.
КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВА бакуловирусная система экспрессии, белки оболочки E1 и E2, вирус гепатита С, вирусо-
подобные частицы, N-гликозилирование белков, клетки насекомых Sf9, клетки млекопитающих Hek293T
и Huh7.0, олигонуклеотид-направленный мутагенез.
