Электрогенное связывание ионов с цитоплазматической стороны Na+,K+,ATP-азыстатья
Статья опубликована в журнале из списка RSCI Web of Science
Информация о цитировании статьи получена из
Web of Science,
Scopus
Статья опубликована в журнале из перечня ВАК
Статья опубликована в журнале из списка Web of Science и/или Scopus
Дата последнего поиска статьи во внешних источниках: 4 января 2018 г.
Аннотация:Изучено электрогенное связывание ионов натрия, калия и протонов в сайтах с цитоплазматической
стороны Na+,K+,ATPазы с помощью измерений приращений емкости и проводимости (адмиттан
са) при скачках рН и концентрации ионов натрия в отсутствие ATP. Скачки рН создавались на бис
лойной липидной мембране (БЛМ) с адсорбированными на ней фрагментами мембран, содержащих
Na+,K+,ATPазу, при быстром освобождении кислоты из связанного состояния (CagedH+) под
действием вспышки ультрафиолетового света. Скачки концентрации ионов натрия создавались с по
мощью быстрой смены растворов в экспериментах, где вместо бислойной липидной мембраны ис
пользовался золотой электрод, покрытый монослоями тиолов и фосфолипидов. Изменение емкости
мембраны, вызванное закислением среды при фотолизе CagedH+, зависело от концентрации ионов
натрия. Аналогичный эффект имели ионы калия. Полученные результаты объяснялись моделью кон
курентного связывания протонов с ионами натрия и калия. Аппроксимация зависимости изменения
емкости от концентрации ионов натрия теоретическими кривыми позволила определить константу
диссоциации K и коэффициент кооперативности n связывания ионов натрия (K = 2.7 мМ, n = 2) и ка
лия (K = 1.7 мМ, n = 2). Похожее значение константы диссоциации для ионов натрия (2.5 мМ) полу
чено в экспериментах с быстрой сменой раствора на золотом электроде, определенное по положению
максимума колоколообразной зависимости изменения емкости от концентрации ионов натрия. В
присутствии ионов магния кажущиеся константы диссоциации ионов натрия возрастали. Вероятно,
эффект ионов магния вызван их связыванием с белком, что ингибирует связывание с ним ионов на
трия, влияя на конформацию белка, либо на электростатический потенциал в сайтах связывания.