Определение кинетики высвобождения BMP-2 из коллагенового носителя методом иммуноферментного анализа в присутствии белков плазмы кровистатья
Статья опубликована в журнале из списка RSCI Web of Science
Статья опубликована в журнале из перечня ВАК
Статья опубликована в журнале из списка Web of Science и/или Scopus
Дата последнего поиска статьи во внешних источниках: 24 января 2020 г.
Аннотация:Костные морфогенетические белки (BMP) — группа мультифункциональных ростовых факторов, принадлежащих к суперсемейству бета-трансформирующего фактора роста (TGF-бета). Основной функцией BMP в организме считают индукцию формирования новой костной ткани. Доказано, что ВМР-2 индуцирует дифференцировку мезенхимальных клеток в хондрогенные и остеогенные клетки, а также способствует пролиферации остеобластов. Ранее основным источником ВМР-2 был деминерализованный костный матрикс, при этом из 1 кг кости удавалось получить около 1 мкг белка. Определение аминокислотной последовательности ВМР-2 позволило создать рекомбинантные аналоги человеческого ВМР-2 (rhBMP-2), синтезируемого в клетках эукариот и в микробиологических продуцентах. В настоящее время имплантируемые материалы, содержащие рекомбинантный ВМР-2, достаточно широко используются в клинической практике. Разработаны имплантируемые материалы отечественного производства и начато их применение в клиниках Российской Федерации. Использование ростовых факторов в клинической практике ограничено следующими условиями. Ростовые факторы должны действовать локально, преимущественно в той области, где необходимо восстановить поврежденную ткань. Поддержание эффективной концентрации факторов роста в зоне регенерации должно быть продолжительным для достижения терапевтического эффекта (не менее 2-3 нед). Возможность длительного локального поддержания необходимой концентрации ростовых факторов обеспечивается включением их в носители, которые обеспечивают замедленное высвобождение данных белков (например, в состав коллагеновых гидрогелей, представляющих собой удобную модельную систему для количественного мониторинга rhBMP-2, высвобождаемого из имплантатов). Наиболее корректным методом оценки эффективности носителя в условиях, приближенных к имеющимся в организме человека, является оценка кинетики высвобождения rhBMP-2 в плазму крови. В связи с этим необходимы тест-системы для определения количества rhBMP-2 в биологических жидкостях для оценки эффективности его удержания в носителе в условиях, приближенных к in vivo. Высокая стоимость коммерческих тестсистем ограничивает их использование в подобных исследованиях. Более того, такие тест-системы предназначены для определения концентрации rhBMP-2, полученного синтезом в эукариотических клетках, поэтому их специфичность может отличаться от специфичности тест-систем для определения rhBMP-2, используемого в наших исследованиях, — нарабатываемого в клетках Escherichia coli. Цель исследования — разработать тест-систему для изучения контролируемого высвобождения rhBMP-2 из полимерных носителей в условиях, максимально приближенных к in vivo.