|
ИСТИНА |
Войти в систему Регистрация |
Интеллектуальная Система Тематического Исследования НАукометрических данных |
||
МОДИФИКАЦИЯ УСЛОВИЙ ВЫДЕЛЕНИЯ И ОЧИСТКИ ГЕМОПОЭТИЧЕСКИХ СТВОЛОВЫХ КЛЕТОК ПУПОВИННОЙ КРОВИ ДЛЯ ПОСЛЕДУЮЩЕГО КУЛЬТИВИРОВАНИЯстатья
- Авторы: Иволгин Д.А., Енукашвили Н.И., Айзенштадт А.А., Адылов Ш.Ф.
- Журнал: Вестник Уральской медицинской академической науки
- Год издания: 2015
- Первая страница: 108
- Последняя страница: 113
- Аннотация: Культивирование стволовых клеток пуповинной крови (ПК) является одним из перспективных направлений по улучшению приживления, а, следовательно, повышению эффективности терапии. Для успешного культивирования необходим подбор ряда условий, что являлось целью данной работы. Было изучено влияние коэффициента разведения ПК буфером PBS (HyClone), содержащим 0,02% ЭДТА, а также влияние используемого при разведении буфера (раствор Хэнкса, HyClone+0,02%ЭДТА или PBS+0,02% ЭДТА) на чистоту выделения и жизнеспособность клеток, выделенных из 18 образцов ПК и культивированных. При подборе коэффициента разведения препаратов ПК установлено, что оптимальным для буфера PBS+0.02% ЭДТА перед центрифугированием на фиколле является разведение 1:1. При больших разведениях увеличивается процент CD34+ клеток в мононуклеарной фракции до и после сепарации (96-99% против 91% при разведении 1:1), однако снижается жизнеспособность клеток (34% при разведении 1:3 против 75% при разведении 1:1). Концентрация клеток через трое суток культивирования возросла до 8*104-105 кл/мл, причем процент CD34+ клеток составлял 100%. Из CD34+ клеток 80% являлись CD133+, КОЕ-тест показал, что на 7 день культивирования в метилцеллюлозной среде 85% составляют CFU-GM, 1.3% - CFU-M, 5.1% - CFU-G и 11.5% - BFU-E+CFU-E. Следует отметить появление к 7 дню культивирования фибробластоподобных клеток в колониях, что говорит о присутствии других стволовых и прогениторных клеток в препаратах. Таким образом, подобранные условия пробоподготовки позволили выделить гемопоэтические стволовые клетки (ГСК) из свежей ПК с высокой степенью очистки (91-99%), с высоким пролиферативным потенциалом.
- Добавил в систему: Енукашвили Натэлла