|
ИСТИНА |
Войти в систему Регистрация |
Интеллектуальная Система Тематического Исследования НАукометрических данных |
||
АТФ как индикатор метаболической активности клетоктезисы доклада
- Авторы: Ломакина Г.Ю., Угарова Н.Н.
- Сборник: VIII Съезд Российского фотобиологического общества, пос. Шепси, 10-15 сентября 2017 года, Материалы Съезда
- Тезисы
- Год издания: 2017
- Место издания: ИФПБ - Пущино Пущино
- Первая страница: 128
- Последняя страница: 128
- Аннотация: Аденозинтрифосфат (9-β-D-рибофуранозиладенин-5'-трифосфат, или 9-β-D-рибо-фуранозил-6-амино-пурин-5'-трифосфат) - нуклеотид, трифосфорный эфир аденозина, который является производным аденина и рибозы, (АТФ), служит универсальным источником химической энергии для функционирования живых существ (млекопитающих, микроорганизмов, растений и т.д.). Энергетическое обеспечение метаболических процессов, происходящих в клетке, а именно: передача энергии и ее восполнение, осуществляется за счет обратимого взаимоперехода АТФ↔АДФ↔АМФ. Таким образом, равновесная концентрация внутриклеточного АТФ отражает функционально-метаболическое состояние живых клеток. Например, содержание АТР в живой клетке на стационарной фазе роста постоянно и достаточно высоко - 10-19 до 10-15 моль АТР и зависит от типа микроорганизма. Безальтернативный селективный и чувствительный метод определения АТФ, который может быть использован для решения многих научных задач, метод биолюминесцентной АТФ-метрии, позволяющий измерять концентрации АТФ в образце ниже, чем 10-12 М практически в режиме реального времени, основан на люциферин-люциферазной реакции. Достоинства метода - короткое время анализа, простота, хорошая воспроизводимость, широкий линейный диапазон определяемых концентраций. Измеряя концентрацию внутриклеточного АТР, можно оценить содержание живых клеток в образце. Метод незаменим для оценки жизнеспособности и некультивируемых, и медленнорастущих микроорганизмов, изучения механизма функционирования клеточных агрегатов и биопленок. При этом анализ биологических жидкостей на содержание АТР может быть осуществлен без предварительной обработки материала – мутность среды и окрашенность практически не мешают анализу. На любые стрессовые воздействия химической, физической и биологической природы клетка отвечает изменением содержания внутриклеточного АТР, которое может быть зафиксировано инструментально. Анализ кинетики изменения уровня внутриклеточного АТР, а также отношения содержаний АТP/АDP, позволяет изучать различные патологии клетки, например, механизмы клеточной гибели – некроза и апоптоза. Метод удобен для оценки цитотоксичности различных агентов, в том числе для скрининга лекарственных препаратов. По соотношению внутриклеточного и внеклеточного АТР можно оценить степень изменения энергетического статуса клетки при оказании на нее внешних воздействий, дифференцировать живые и разрушенные клетки, например, при замораживании, в процессе лиофилизации и других технологических процессах. Таким образом, биолюминесцентный метод определения АТФ является мощным инструментом для изучения механизма функционирования клеток.
- Добавил в систему: Ломакина Галина Юрьевна