|
ИСТИНА |
Войти в систему Регистрация |
Интеллектуальная Система Тематического Исследования НАукометрических данных |
||
Isolation of recombinant human untagged glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase from E. coli producer strainстатья
Информация о цитировании статьи получена из
Web of Science,
Scopus
Статья опубликована в журнале из списка Web of Science и/или Scopus
Дата последнего поиска статьи во внешних источниках: 12 июля 2017 г.
- Авторы: Barinova KV, Eldarov MA, Khomyakova EV, Muronetz VI, Schmalhausen EV
- Журнал: Protein Expression and Purification
- Номер: 137
- Год издания: 2017
- Издательство: Academic Press
- Местоположение издательства: United States
- Первая страница: 1
- Последняя страница: 6
- DOI: 10.1016/j.pep.2017.06.009
- Аннотация: Целью работы была экспрессия глицеральдегид-3-фосфатдегидрогеназы человека (hGAPD), не содержащей таговых конструкций, в клетках E. сoli и разработка метода очистки рекомбинантного белка с высокой ферментативной активностью из экстракта клеток-продуцентов. Разработана достаточно простая процедура очистки hGAPD, которая включает в качестве основного метода фракционирование сульфатом аммония. Окончательная очистка проводилась при помощи гель-хроматографии на сефадексе G-100. Описанный метод позволяет выделить из 10 г сырой биомассы 2 – 3 мг чистого рекомбинантного белка hGAPD c удельной активностью 117±5 мкмоль NADH/мин мг (pH 9,0, 22ºC), что совпадает с величиной активности глицеральдегид-3-фосфатдегидрогеназы из мышц кролика, измеренной при тех же условиях. Данная методика может пригодиться исследователям, которым необходим препарат нативной глицеральдегид-3-фосфатдегидрогеназы человека с высокой ферментативной активностью.
- Добавил в систему: Шмальгаузен Елена Викторовна