Identification of components and features of a H.polymorpha telomerase complex: towards an understanding of cell division controlтезисы доклада

Дата последнего поиска статьи во внешних источниках: 28 мая 2015 г.

Работа с тезисами доклада


[1] Identification of components and features of a h.polymorpha telomerase complex: towards an understanding of cell division control / M. Zvereva, A. Malyavko, E. Smekalova et al. // International Scientific Conference Pharmaceutical and Medical Biotechnology. — ЗАО Экспо-биохим-технологии Москва, 2012. — P. 495. Теломераза является ключевым ферментом в поддержании длины теломер в клетках эукариот. Теломеры поддерживают стабильность хромосом, защищая их от разрушения, а также участвуют в контроле количества клеточных делений. Теломеры укорачиваются с каждым делением клетки. Как только теломеры достигают критической длины, клетка вступает в состояние сенессенса и в дальнейшем умирает от апоптоза. Чтобы избежать этого процесса некоторые типы клеток (в частности, половые, стволовые и раковые клетки) используют компенсаторные механизмы - одним из таких механизмов является активация теломеразы. Следует отметить малочисленные данные о структуре теломеразных компонентов: данные доступны только для некоторых теломеразных белков. Знание структуры полного комплекса теломеразы позволит разработать соединения, блокирующие активный центр фермента, что необходимо для нормализации контроля количества делений клеток в раковых опухолях. Белки из термофильных организмов обычно более устойчивы, чем их аналоги из других организмов. Таким образом, в рамках данного проекта мы выбрали для работы теломеразу из термотолерантных дрожжей Hansenula polymorpha. Основными компонентами теломеразы являются теломеразы РНК (TR) и белковая субъединица - теломеразная обратная транскриптаза (TERT). Эти два компонента являются достаточными для активности теломеразы in vitro, в то время как в естественных условиях необходимы дополнительные белки : Est1, Est3 и Сdc13 в S. cerevisiae. Мы определили основные компоненты теломеразы дрожжей Hansenula polymorpha. Мы оптимизировали условия для выделения H. polymorpha TERT и его N-концевого домена при экспрессии в E.coli. Показали функцианальную активность выделенного полноразмерного белка TERT, и мы находимся на пути к определению условий кристаллизации для последующего разрешения структуры TERT и его N-концевого домена. Мы также определили возможные гены других белков теломеразы Hansenula polymorpha (Est1, Est3) и проверили их пригодность для структурных исследований. Исследования особенностей функционирования теломеразы Hansenula polymorpha помогут понять механизм ее участия в ограничении длины теломер в клетке.

Публикация в формате сохранить в файл сохранить в файл сохранить в файл сохранить в файл сохранить в файл сохранить в файл скрыть