|
ИСТИНА |
Войти в систему Регистрация |
Интеллектуальная Система Тематического Исследования НАукометрических данных |
||
АРХИТЕКТУРА И ДИНАМИКА МИКРОТРУБОЧЕК В КЛЕТКАХ ПАЦИЕНТОВ С БОЛЕЗНЬЮ ГЕНТИНГТОНАтезисы доклада
- Авторы: Чуркина А.С., Паско В.И., Беликова Л.Д., Богомазова А.Н., Лагарькова М.А., Алиева И.Б.
- Сборник: Сборник тезисов 26-ой Пущинской школы-конференции молодых ученых с международным участием «БИОЛОГИЯ – НАУКА XXI ВЕКА»
- Тезисы
- Год издания: 2023
- Место издания: Федеральное государственное бюджетное учреждение науки «Федеральный исследовательский центр «Пущинский научный центр биологических исследований Российской академии наук» Пущино
- Первая страница: 118
- Последняя страница: 119
- Аннотация: Болезнь Гентингтона (HD) является нейродегенеративным заболеванием и развивается как следствие полиглутаминовой мутации в гене белка гентингтина (HTT). Показано, что HTT участвует в разнообразных клеточных процессах, в том числе в клеточном транспорте и эндоцитозе. В эти процессы вовлечены микротрубочки (МТ), являющиеся потенциальной мишенью при развитии данной патологии. МТ полимеризуются из тубулина, обладают полярностью, динамическими свойствами, функционируют как «рельсы» для внутриклеточного транспорта, опосредованного моторными белками. Нарушения в динамике МТ и архитектуре их сети сопровождают многие заболевания, в том числе нейродегенеративные, что мотивировало нас на исследование их исследование у пациентов с HD.В работе мы использовали фибробласты, выделенные из биоптатов кожи пациентов с HD с различной длиной полиглутаминового фрагмента в белке НТТ, и соответствующих им по возрасту здоровых доноров. Кроме того, мы анализировали нейроны и глиальные клетки, полученные методом направленной дифференцировки из ИПСК пациентов с HD и здоровых доноров. Для исследования динамических свойств МТ был использован метод трансфекции флуоресцентно-меченным плюс-концевым белком EB3-GFP, который позволил наблюдать за ростом и разборкой плюс-концов МТ в режиме реального времени. Далее динамику МТ анализировали в автоматическом режиме, используя собственные скрипты и плагины программы ImageJ, и методом ручного трассирования, который в условиях наших экспериментов давал наименьшую ошибку измерений. Динамику МТ исследовали в различных областях клетки: в центральной части (в области ядра и центросомы), на ведущем крае и в хвосте фибробластов; в аксонах и дендритах нейронов. Также была проанализирована динамика восстановления сети МТ после ее разборки на холоде в фибробластах кожи. В этом случае измеряли количество растущих от центросомы МТ, их длина, количество доходящих до края клетки МТ. Архитектуру сети МТ характеризовали по иммуноцитохимической окраске, сравнивая степень кривизны МТ, количество МТ, доходящих до края клетки, количество пионерских МТ. Полученные результаты позволили оценить in vitro различия в динамике и архитектуре сети МТ клеток HD-пациентов и здоровых доноров, что дает возможность описать влияние мутантного HTT на свойства МТ.Работа поддержана грантом No 075-15-2019-1669 Министерства науки и высшего образования РФ (культивирование клеток), Программой Развития МГУ им. М. В. Ломоносова (PNR5.13) и Nikon Center of Excellence в НИИ ФХБ им. А. Н. Белозерского МГУ. им. М. В. Ломоносова.
- Добавил в систему: Чуркина Александра Сергеевна