Структурные исследования рекомбинантного ростового домена урокиназыстатья

Статья опубликована в журнале из списка RSCI Web of Science
Статья опубликована в журнале из перечня ВАК

Работа с статьей

Прикрепленные файлы


Имя Описание Имя файла Размер Добавлен
1. 575_591_Beloglazova.pdf 575_591_Beloglazova.pdf 687,1 КБ 13 апреля 2017 [BeloglazovaIrina]

[1] Структурные исследования рекомбинантного ростового домена урокиназы / И. Б. Белоглазова, P. Ш. Бибилашвили, Я. Г. Гурский и др. // Биохимия. — 2013. — Т. 78, № 5. — С. 675–691. Активатор плазминогена урокиназного типа (uPA) является сериновой протеазой, которая переводит про фермент плазминоген в протеолитически активную форму плазмин. Урокиназа синтезируется и секретиру ется в виде одноцепочечной молекулы, состоящей из Nконцевого домена (GFD), кринглдомена (KD) и C концевого протеолитического домена (PD). Структура ATF (фрагмент урокиназы, состоящий из GFD и KD) в свободном состоянии и в комплексе с рецептором урокиназы (uPAR, CD87), лишенным ГФИякоря, была изучена ранее методами ЯМР (Hansen et al., 1994) и рентгеноструктурного анализа (Barinka et al., 2006). Согласно полученным данным, в структуре GFD выделяют две области, состоящие из βслоев, ориентиро ванных перпендикулярно друг к другу. GFDобласть, отвечающая за связывание с uPAR, расположена в подвижной Ωпетле, состоящей из семи аминокислотных остатков и соединяющей два тяжа антипарал лельного βслоя. Методом точечного мутагенеза было показано, что укорачивание Ωпетли на одну амино кислоту приводит к неспособности GFD взаимодействовать с uPAR (Magdolen et al., 1996).В отличие от вы шеупомянутых данных, мы не получили какихлибо признаков наличия участков βслоев в GFD в получен ных нами образцах uPA как в свободном состоянии, так и в комплексе с uPAR. GFD Представляется доста точно гибким и неструктурированным доменом, способным, тем не менее, к высокоспецифичному взаимо действию с uPAR как in vitro, так и в экспериментах с клеточными культурами. Для оценки вторичной струк туры GFD урокиназы мы использовали круговой дихроизм, изменение флюоресценции триптофана при температурной денатурации белка и гетероядерную ЯМРспектроскопию ATF, меченного 15N и 13C, в сво бодном состоянии и в комплексе с uPAR. КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВА: урокиназа, урокиназный рецептор, ЯМР, Ωпетля.

Публикация в формате сохранить в файл сохранить в файл сохранить в файл сохранить в файл сохранить в файл сохранить в файл скрыть