Влияние природы буферного раствора на каталитическую активность NAD+-зависимой формиатдегидрогеназы из бактерий Staphylococcus aureus

Юрченко, Т.С.; Болотова, С.Б.; Логинова, А.А.; Пометун, Е.В.; Савин, С.С.; Пометун, А.А.; Тишков, В.И.

Авторы: Юрченко Т.С., Болотова С.Б., Логинова А.А., Пометун Е.В., Савин С.С., Пометун А.А., Тишков В.И.
Журнал: Вестник Московского университета. Серия 2: Химия
Том: 63
Номер: 6
Год издания: 2022
Издательство: Издательский дом МГУ
Местоположение издательства: Москва
Первая страница: 405
Последняя страница: 417
Аннотация: NAD+-зависимая формиатдегидрогеназа из бактерий Staphylococcus aureus (SauФДГ, КФ 1.2.1.2) является самым активным ферментом среди известных ФДГ данного типа, однако из-за высоких значений KM как по NAD+, так и по формиату, ее каталитическая эффективность kcat/KM по обоим субстратам в фосфатном буфере меньше таковых для других формиатдегидрогеназ. Проведено исследование влияния природы буферного раствора на каталитические свойства SauФДГ. Были определены значения kcat и KM по обоим субстратам в буферных системах на основе фосфата натрия (NaPB) в двойных, тройных и четверных буферных системах, содержащих Tris, Gly и цитрат-ион (Cit). Показано, что использование этих буферов не влияет на KM по формиату, в то время для kcat и KMNAD+ наблюдались значительные изменения (как повышение, так и уменьшение). Наибольший положительный эффект был получен в случае четверного буфера NaPB-Cit-Tris-Gly. При концентрации каждого компонента 0,05 М значение kcat возрастает на 70% по сравнению со стандартным 0,1 М фосфатным буфером, а при концентрации каждого компонента 0,1 М улучшаются как kcat , так и KMNAD+ . На примере фосфатного и четверного буфера показано, что при концентрации соли(ей) 0,1 М и выше происходит увеличение термостабильности SauФДГ, причем эффект стабилизации зависит от величины ионной силы и не зависит от природы буфера. Сравнение трехмерных структур холо-форм SauФДГ и ФДГ из бактерий Pseudomonas sp.101 свидетельствует, что в отличие от PseФДГ активный центр SauФДГ даже в комплексе с субстратом доступен растворителю и компонентам буфера, что может быть причиной изменения значений kcat и KMNAD+ в буферных растворах разного состава.
Добавил в систему: Тишков Владимир Иванович

	ИСТИНА	Войти в систему Регистрация
	Интеллектуальная Система Тематического Исследования НАукометрических данных
	Главная Поиск Статистика О проекте Помощь

ИСТИНА

Интеллектуальная Система Тематического Исследования НАукометрических данных

Влияние природы буферного раствора на каталитическую активность NAD+-зависимой формиатдегидрогеназы из бактерий Staphylococcus aureusстатья

Прикрепленные файлы