Фемто и пикосекундная динамика первичных реакций рекомбинантного бактериородопсина в сравнении с природным белком в тримерном и мономерном состоянияхстатья
Статья опубликована в журнале из списка RSCI Web of Science
Статья опубликована в журнале из перечня ВАК
Статья опубликована в журнале из списка Web of Science и/или Scopus
Дата последнего поиска статьи во внешних источниках: 24 января 2020 г.
Аннотация:Динамика образования первичных интермедиатов фотоцикла рекомбинантного бактериородопсина (БРрек) была исследована методом фемтосекундной абсорбционной лазерной спектроскопии с разрешением 25 фс. БРрек был получен в экспрессионной системе Escherichia coli. Поскольку БРрек был получен в мицеллярной системе DMPC-CHAPS в мономерном состоянии, было проведено его сравнение с тримерной и мономерной формами природного бактериородопсина (БРтрим и БРмон, соответственно). Показано, что интермедиат I БРрек (возбужденное состояние) образуется в пределах 100 фс, как и у образцов БРтрим и БРмон. Дальнейшие процессы, а именно распад возбужденного состояния БРрек и образование интермедиатов J и K, происходят несколько медленнее по сравнению с БРтрим, но близки по своим характеристикам к БРмон. Время жизни I, судя по сигналу ∆AESA(470-480 нм), составило 0.68 пс (78%) и 4.4 пс (22%) для БРрек, 0.52 пс (73%) и 1.7 пс (27%) для БРмон и 0.45 пс (90%) и 1.75 пс (10%) для БРтрим. Увеличение времени жизни возбужденного состояния БРмон по сравнению с БРтрим согласуется с данными работы [1], проведенной тем же методом с разрешением 100 фс. Время образования интермедиата K, судя по сигналу ∆AGSA(625-635 нм), составило 13.5 пс для БРрек, 9.8 пс БРмон и 4.3 пс для БРтрим. Также наблюдается некоторое уменьшение эффективности фотореакции БРрек и БРмон по сравнению с БРтрим, что видно по падению поглощения K в дифференциальном спектре на ≈14%. Поскольку БРрек по своим фотохимическим свойствам близок к природному белку в мономерном состоянии, то БРрек и его мутантные формы могут служить основой для дальнейшего изучения механизма функционирования бактериородопсина.