Аннотация:В этом исследовании лихеназа Clostridium thermocellum (эндо-β-1,3;1,4-глюкан-D-гликозилгидролаза, ЕС 3.2.1.73 (Р29716)) апробирована в роли белка, принимающего в двух областях инсерцию двух модельных флуоресцентных белков (EGFP и TagRFP). Функциональная укладка всех доменов подтверждена сохранением ферментативной активности лихеназы и флуоресценции EGFP и TagRFP. Полученные результаты убедительно свидетельствуют, что (i) два экспериментально апробированных петлевых региона лихеназы могут служить областями для инсерции белков без нарушения ее фолдинга in vivo, (ii) лихеназа способна допускать не только одиночные, но и тандемные вставки крупных белковых доменов. Высокая активность и термостабильность, эффективный рефолдинг in vitro лихеназы делает ее привлекательной в качестве нового принимающего «host»-белка при использовании подхода инсерционного слияния доменов в инженерии многофункциональных белков.