|
ИСТИНА |
Войти в систему Регистрация |
Интеллектуальная Система Тематического Исследования НАукометрических данных |
||
Исследование динамики микротрубочек в фибробластах кожи пациентов с Болезнью Гентингтонатезисы доклада
- Авторы: Таран А.С., Шувалова Л.Д., Лаврушкина С.В., Богомазова А.Н., Лагарькова М.А., Алиева И.Б.
- Сборник: III ОБЪЕДИНЕННЫЙ НАУЧНЫЙ ФОРУМ ФИЗИОЛОГОВ, БИОХИМИКОВ И МОЛЕКУЛЯРНЫХ БИОЛОГОВ ♦ VII СЪЕЗД БИОХИМИКОВ РОССИИ ♦ X РОССИЙСКИЙ СИМПОЗИУМ «БЕЛКИ И ПЕПТИДЫ» ♦ VII СЪЕЗД ФИЗИОЛОГОВ СНГ (НАУЧНЫЕ ТРУДЫ.Сочи, Дагомыс, 3–8 октября 2021)
- Том: 1
- Тезисы
- Год издания: 2021
- Место издания: «Перо» Москва, Нижегородская ул., д. 29-33, стр. 15, ком. 536
- Первая страница: 81
- Последняя страница: 81
- Аннотация: Болезнь Гентингтона (HD) является следствием мутации в гене белка гентингтина (HTT), участвующего в процессах клеточного транспорта и эндоцитоза. В эти процессы вовлечены микротрубочки (МТ), являющиеся потенциальной мишенью при развитии данной патологии. Полимеризованные из тубулина, обладающие полярностью, МТ динамичны, они являются «рельсами» для внутриклеточного транспорта, опосредованного моторными белками. Нарушения в динамике МТ сопровождают многие нейродегенеративные заболевания, что мотивировало нас на исследование изменения их динамики у пациентов с HD. Поскольку мутантный НТТ экспрессируется во всех клетках больного, в качестве модели мы использовали фибробласты, выделенные из биоптатов кожи пациентов с HD и соответствующих им по возрасту доноров. Динамичность МТ регулируется белками, ассоциированными с их концами. С плюс-концом МТ, на котором происходит преимущественно добавление субъединиц тубулина, ассоциированы многочисленные регуляторные белки, в частности белки семейства EB (end-binding), выполняющие стабилизирующую функцию. Флуоресцентно-меченные плюс-концевые белки МТ являются классическими маркерами, позволяющими визуализировать положение плюс-конца МТ в цитоплазме живой клетки, а по изменению положения анализировать динамику МТ. Однако при исследовании первичной культуры фибробластов используемый для этого стандартный метод трансфекции потребовал модификаций для повышения его эффективности, оптимальной оказалась трансфекция липофектамином 3000. МТ маркировали флуоресцентно-меченным EB-3 и наблюдали за их смещением в режиме реального времени, фиксируя динамику МТ на видео. Динамику МТ анализировали в автоматическом режиме (используя собственные скрипты и плагины программы ImageJ) и методом ручного трассирования, который в условиях наших экспериментов давал наименьшую ошибку измерений. Динамику МТ исследовали в различных областях клетки: в центральной части (в области ядра и центросомы), на ведущем крае и в хвосте фибробластов. Полученные результаты позволили оценить in vitro различия в динамике МТ фибробластов кожи HD-пациентов и здоровых доноров, что позволяет описать влияние мутантного HTT на динамические свойства МТ. Поддержано РНФ (№ 19-15-00425) и Программой Развития МГУ им. М.В. Ломоносова (PNR5.13).
- Добавил в систему: Чуркина Александра Сергеевна