|
ИСТИНА |
Войти в систему Регистрация |
Интеллектуальная Система Тематического Исследования НАукометрических данных |
||
Сходимость и временная стабильность количественной оценки экспрессии белка βIII-тубулина в ткани солидных опухолейстатья
Статья опубликована в журнале из списка RSCI Web of Science
Статья опубликована в журнале из перечня ВАК- Авторы: Башарина А.А., Богуш Т.А., Рукавишникова Е.А., Богуш Е.А., Калюжный С.А., Вихлянцева Н.О., Косоруков В.С.
- Журнал: Российский биотерапевтический журнал
- Том: 19
- Номер: 3
- Год издания: 2020
- Издательство: Изд. группа РОНЦ
- Местоположение издательства: М.
- Первая страница: 52
- Последняя страница: 56
- Аннотация: Введение. Введение в клиническую практику молекулярного фенотипирования опухолей продемонстрировало необходимость создания новых аналитических методов оценки экспрессии маркёров в сóлидных новообразованиях, поскольку рутинно используемый метод иммуногистохимии характеризуется рядом существенных недостатков. Цель исследования – аналитическая валидация разработанного авторами иммунофлуоресцентного метода, ассоциированного с проточной цитометрией, для изучения опухолевых белковых маркёров в ткани сóлидных новообразований. Материалы и методы. Валидация метода проведена при количественной оценке экспрессии белка βIII-тубулина (TUBB3) в суспензиях клеток немелкоклеточного рака легкого, полученных из хирургических образцов опухоли. Для иммунофлуоресцентного окрашивания использованы первичные антитела к TUBB3 (ab7751) и вторичные – конъюгированные с красителем DyLight 650 (ab98729). Для измерения флуоресценции клеток использовали проточный цитометр Navios (Beckman Coulter). Для оценки валидационных параметров использован коэффициент вариации, рассчитанный как отношение среднеквадратического отклонения уровня TUBB3 к его среднему значению. Результаты. Проведен анализ 2 параметров: сходимости и временнóй стабильности результатов оценки экспрессии TUBB3. Показано, что средний коэффициент вариации уровня экспрессии исследованного маркёра в ткани опухоли при оценке сходимости и стабильности иммунофлуоресцентной окраски не превысил 20 %. Согласно рекомендациям по аналитической валидации методов, основанных на использовании проточного цитометра, это доказывает валидность метода по исследованным параметрам. Заключение. Показана сходимость и временнáя стабильность результатов количественной оценки экспрессии прогностически и предиктивно значимого белка TUBB3 в ткани сóлидных опухолей при использовании разработанного авторами метода иммунофлуоресцентного окрашивания, ассоциированного с проточной цитометрией. Отмечена практическая значимость факта временнóй стабильности иммунофлуоресцентной окраски при хранении суспензии окрашенных клеток в темноте при 4 °C в течение 24 ч, что указывает на возможность варьирования интервала времени от завершения аналитической части исследования до работы на проточном цитометре.
- Добавил в систему: Башарина Анна Александровна