|
ИСТИНА |
Войти в систему Регистрация |
Интеллектуальная Система Тематического Исследования НАукометрических данных |
||
Интенсивный синтез белка с сигналом ядерной локализации стимулирует репродукцию вируса в растениистатья
- Авторы: Комарова Т.В., Шешукова Е.В., Ершова Н.М., Дорохов Ю.Л.
- Сборник: Биотехнология: состояние и перспективы развития
- Серия: Международный форум Биотехнология: состояние и перспективы развития
- Год издания: 2020
- Первая страница: 16
- Последняя страница: 17
- DOI: 10.37747/2312-640X-2020-18-16-17
- Аннотация: Повышенная экспрессия чужеродного гена может влиять на функционирование растительных клеток, в том числе, модифицируя ядерно-цитоплазматический транспорт макромолекул. Мы предполагаем, что чужеродные белки, содержащие сигнал ядерной локализации (NLS), такие как бактериальные эффекторные белки, нуклеомодулины, могут препятствовать импорту собственных ядерных белков клетки. В данной работе мы изучали эффект повышенного синтеза в растении химерных белков, содержащих последовательность флуоресцентного белка GFP или RFP и сигнал ядерной локализации разной природы, в качестве миметиков бактериального эффектора. Используя систему временной экспрессии, мы создали условия для суперпродукции искусственных белков, содержащих NLS и направляемых в ядро. По нашему предположению это должно привести к конкуренции с клеточными ядерными белками за факторы ядерного импорта и нарушению ядерно-цитоплазматического транспорта. В результате создаются благоприятные условия для репродукции РНК-содержащих цитоплазматических вирусов растений. В своей работе мы проверили это предположение: используя NLS протимозина α человека (NLSpTα), белка VirE3 Agrobacterium tumefaciens (NLSVirE3), а также идентифицированного нами NLS нуклеомодулина PopP2 патогенной бактерии Ralstonia solanacearum мы показали, что интенсивный синтез искусственных NLS-содержащих белков стимулирует репродукцию вируса табачной мозаики (ВТМ) и накопление мРНК γ-тионина, который является одним из важных участников реакций растений на биотические стрессы, в том числе на бактериальную инфекцию. Для подтверждения взаимосвязи между репродукцией ВТМ и индукцией γ-тионина, мы выделили промотор гена γ-тионина (PRγThio) и создали кассету экспрессии PRγThio:GUS для синтеза β-глюкуронидазы (GUS) в качестве репортерной молекулы в системе временной экспрессии в растении. Хотя конститутивная активность PRγThio была намного ниже, чем у традиционно используемого в биотехнологии промотора 35S РНК вируса мозаики цветной капусты, она резко возрастала, когда в клетке присутствовал GFP, слитый с NLSpTα или NLSVirE3. Таким образом, накопление мРНК γ-тионина, вызванное интенсивным синтезом чужеродного ядерного белка в системе временной экспрессии, может быть причиной стимуляции репродукции вирусной РНК.
- Добавил в систему: Комарова Татьяна Валерьевна