Аннотация:КУЛЬТУРА КЛЕТОК DIGITALIS SPP. КАК ИСТОЧНИКБИОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНЫХ ВЕЩЕСТВ*Ключевые слова: культура клеток in vitro, Digitalis spp., наперстянка,биологически активные вещества.Digitalis L. (наперстянка) – род травянистых растений, принадлежащий ксемейству Plantaginaceae и включающий свыше 30 видов. Наиболее ценнымиметаболитами наперстянок являются сердечные гликозиды, которыеиспользовались для лечения больных с сердечно-сосудистой недостаточностьюболее 200 лет. В растениях Digitalis spp. обнаружены также стероидныегликозиды и многие фенольные соединения (антрахиноны, фенилэтаноиды,флавоноиды) [1, 2].Среди наперстянок встречается много редких, исчезающих и эндемичныхвидов, также, стоит отметить, что качественное и количественное содержаниецелевых соединений в интактных растениях зависит как от климатических ипогодных условий, так и от срока вегетации растения [2]. Альтернативнымисточником биологически активных веществ может выступать культура клетоквысших растений, которая дает возможность получать экологически чистоерастительное сырье с контролируемым составом и содержанием целевыхсоединений независимо от климатических и погодных условий.Цель настоящей работы – получение культур клеток и тканей Digitalislanata Ehrh., D. grandiflora Mill. и D. ciliata Trautv. и исследование ихбиосинтетических характеристик.Для получения культур клеток и тканей использовали асептическиепроростки, выращенные из семян D. lanata, D. grandiflora и D. ciliata, взятых изБотанического сада биологического факультета МГУ имени М.В.Ломоносова.Семена стерилизовали 50 % раствором гипохлорита натрия («Белизна», Россия)и проращивали при 16-часовом световом дне и 25±1ºC. Каллусную и ризогеннуюкультуры индуцировали на чашках Петри с агаризованной средой МурасигеСкуга (MS), дополненной α-нафтилуксусной кислотой (α-НУК) и кинетином(Merck, Германия). Культивирования проводили в темноте при 25±1ºC.Суспензионные культуры клеток получали из 4-недельных каллусных культур вжидкой питательной среде MS, дополненной α-НУК и кинетином. Выращиваниепроводили в колбах объемом 250 мл (35–40 мл суспензии в колбе) на качалке(100 об/мин) в темноте при 25±1ºC. Для пересадки использовали соотношениеинокулюм : свежая среда равное 1 : 5. Цикл культивирования составлял 21 день.Фитохимический анализ экстрактов из культур клеток и тканей проводилиметодом ультраэффективной жидкостной хроматографии с массспектрометрическим детектированием (УЭЖХ ЭР МС).В результате выполнения работы было установлено, что на даннойпитательной среде у D. lanata формировались только ризогенные культуры. ДляD. grandiflora, наряду с ризогенезом, был отмечен каллусогенез,характеризующийся появлением как миксотрофных (зеленых), так игетеротрофных (бело-желтых) каллусов. У D. ciliata формировалисьпреимущественно миксотрофные каллусы. Полученные суспензионныекультуры клеток D. grandiflora и D. ciliata имели бело-желтый или желтозеленый цвет соответственно, содержали агрегаты меристемоподобных клеток(преимущественно размером 10–20 клеток в агрегате), а также одиночныепаренхимоподобные и удлиненные клетки.УЭЖХ ЭР МС-анализ показал отсутствие в детектируемых количествах вэкстрактах из культур клеток и тканей сердечных гликозидов, – основныхвторичных метаболитов интактных растений наперстянок. В свою очередь, вобразцах были обнаружены гликозиды фенилэтаноидов (дигицилизид А,дигицилизид В, максозид) и стероидные гликозиды фуростанолового ряда,имеющие в качестве агликонов гитогенин и тигогенин.