H+-АТФаза и Na+-АТФаза плазматической мембраны галотолерантной микрово-доросли Tetraselmis (Platymonas) viridis: электрофоретическое разделение и идентификациятезисы доклада

Работа с тезисами доклада


[1] Стриж И. Г., Попова Л. Г., Балнокин Ю. В. H+-АТФаза и na+-АТФаза плазматической мембраны галотолерантной микрово-доросли tetraselmis (platymonas) viridis: электрофоретическое разделение и идентификация // Сборник тезисов докладов II международного симпозиума “Проблемы биохимии, радиационной и космической биологии”. — Дубна, 2001. — С. 106–106. Ранее, на везикулярных препаратах плазматической мембраны (ПМ) Tetraselmis (Platymonas) viridis были функционально идентифицированы две катион-транслоцирующие АТФазы р-типа: H+-АТФаза и Na+-АТФаза, обеспечивающие активный экспорт ионов Na+. Теоретически, перенос Н+ может осуществляться АТФазой, в норме транспортирующей ионы Na+ . Для выяснения, осуществляется ли транспорт Н+ и Na+ через ПМ T. viridis двумя различными ферментами или, возможно, одним, была поставлена задача идентифицировать H+-АТФазу и Na+-АТФазу среди полипептидов плазматической мембраны. Электрофоретическое разделение белков ПМ в SDS-ПААГ позволило выявить несколько полипептидов с молекулярными массами, характерными для АТФаз р-типа: 112 kDa, 105 kDa, 100 kDa. Для идентификации фосфоинтермедиатов АТФаз было проведено фосфорилирование белков ПМ с помощью [-32P]ATP с последующим электрофоретическим разделением полипептидов в кислом (pH 2,4) ПААГ и радиоавтографией гелей. В присутствии ионов Na+ стабильно регистрируется фосфоинтермедиат Na+-АТФазы с молекулярной массой 105-108 kDа. Включение метки в условиях оптимальных для работы Н+-АТФазы регистрируется в области 70 kDa только в препаратах, предварительно обработанных трипсином. Предполагается, что этот полипептид является активированной формой Н+-АТФазы, возникшей в результате частичного протеолиза белка с исходной молекулярной массой около 100 kDa . (Исследование поддержано грантом РФФИ, проект N 01-04-49135).

Публикация в формате сохранить в файл сохранить в файл сохранить в файл сохранить в файл сохранить в файл сохранить в файл скрыть