Динамика морфофункционального развития нейронной сети в диссоциированной культуре клеток коры головного мозга крысыстатья
Статья опубликована в журнале из списка RSCI Web of Science
Статья опубликована в журнале из перечня ВАК
Статья опубликована в журнале из списка Web of Science и/или Scopus
Дата последнего поиска статьи во внешних источниках: 4 мая 2020 г.
Аннотация:Введение. Исследование морфофункционального развития нейронов в диссоциированной культуре клеток головного мозга с использованием современных клеточных технологий является актуальной задачей экспериментальной неврологии, решение которой необходимо для успешного моделирования in vitro острых и хронических форм церебральной патологии.
Цель работы — морфофункциональное исследование in vitro динамики дифференцировки нейронов коры головного мозга крыс с использованием комплекса методов иммуноцитохимического, флюоресцентного и электрофизиологического анализа.
Материалы и методы. Исследована степень дифференцировки культур на 3–4-е и 10–11-е сутки культивирования in vitro, определяемая по интенсивности экспрессии белка PSA-NCAM и уровню кальциевой перегрузки нейронов под влиянием глутамата, в сопоставлении с показателями функциональной активности нейронной сети, культивированной на мультиэлектродной матрице, и их изменениями при гиперстимуляции глутаматных рецепторов.
Результаты. Для зрелых нейронов (10–11 сут культивирования) характерны значительное повышение концентрации внутриклеточного кальция, вызываемое глутаматом, отсутствие в них околоядерных скоплений PSA-NCAM, обнаруживаемых лишь в незрелых клетках (3–4 сут
культивирования), торможение глутаматом пачечной активности нейронной сети, сформированной к 10–11-м суткам in vitro, при отсутствии его влияния на генерацию одиночных потенциалов действия. В то же время экзогенный селективный агонист одного из подтипов глутаматных рецепторов — каинат полностью блокировал спонтанную активность зрелых нейронов.
Заключение. К 10–11-м суткам культивирования in vitro нейроны новой коры крыс достигают уровня дифференцировки, необходимого для моделирования церебральных патологических состояний. К этому сроку процесс нарушения функционирования нейронной сети, сформированной
на мультиэлектродной матрице, при гиперактивации глутаматных рецепторов носит многоуровневый характер: при эксайтотоксическом повреждении под влиянием глутамата избирательно нарушается пачечная активность нейронов, а при более выраженной цитотоксичности,вызываемой каинатом, спонтанная биоэлектрическая активность блокируется полностью.