Аннотация:Почти общепризнано, что Fo∙F1 – обратимо функционирующий комплекс, катализирующий либо гидролиз АТР, сопряженный с векторным переносом протонов (или Na+) через мембрану, либо синтез АТР, используя свободную энергию такого переноса в обратном направлении. Подавляющее большинство данных, приведших к такому представлению, было выполнено при изучении АТР-гидролазной активности комплекса, легко регистрируемой при использовании либо его водорастворимого фрагмента (F1), либо Fo∙F1, связанного с несопряженными мембранами и неспособного катализировать энерго-зависимый синтез АТР. В течение многих лет внимание нашей группы было сосредоточено на проблеме обратимости функционирования Fo∙F1 комплекса с использованием прочносопряженных пространственно инвертированных субмитохондриальных фрагментов. Полученные результаты привели нас к представлению, впервые сформулированному еще в 1980 году [1], о том, что механизмы синтеза и гидролиза АТР различны [2]. В последние годы мы обратились к изучению суббактериальных фрагментов P. denitrificans – единственному доступному объекту, позволяющему прослеживать как естественный энерго-зависимый синтез АТР, так и обратную реакцию [3]. Анализ обоих процессов позволил сформулировать гипотезу о существовании двух независимо функционирующих изоформ Fo∙F1: АТРазы и АТРсинтазы [4]. В настоящей работе сообщаются результаты изучения кинетики синтеза АТР и изменений мембранного потенциала в мембранах P. denitrificans, демонстрирующих классическое явление дыхательного контроля [4]. При значении рН среды 7,0, при котором гидролитическая активность Fo∙F1 почти отсутствует, и 8,0, при котором эта активность соизмерима с АТР синтазной, кинетика синтеза или гидролиза АТР и электрических ответов мембран соответствует модели функционирования двух независимых (неравновесных) изоформ Fo∙F1.
1. Minkov I. B., Vasilyeva E. A., Fitin A. F., Vinogradov A. D. (1980) Biochem. Int. 1, 478-485
2. A.D. Vinogradov, (2000) J. Exp. Biol. 203, 41-49
3. Zharova T.V., Vinogradov A.D. (2004) J. Biol. Chem, 279, 12319-12324
4. Zharova T.V., Vinogradov A.D. (2017) Biochim. Biophys. Acta 1858 939-944
5. Zharova T.V., Vinogradov A.D. (2014) Biochim. Biophys. Acta 1837, 1322-1329
Работа поддержана грантом РФФИ 17-04-00706