Гетерологичная экспрессия, очистка и свойства белка-ингибитора сериновых протеиназ из картофелястатья
Статья опубликована в журнале из списка RSCI Web of Science
Статья опубликована в журнале из перечня ВАК
Статья опубликована в журнале из списка Web of Science и/или Scopus
Дата последнего поиска статьи во внешних источниках: 24 января 2020 г.
Аннотация:Ген PKPI-B10 [AF536175], кодирующий в картофеле (Solanum tuberosum L., сорт Истринский) белок-ингибитор протеиназ типа Кунитца клонирован в вектор рЕТ23а и затем экспрессирован в Escherichia coli. Ре-комбинантный белок PKPI-B10, полученный в виде телец включения, денатурирован, отделен от примесей методом высокоэффективной ионообменной хроматографии (FPLC) на колонке Mono Q в денатурирующих условиях и ренатурирован. Нативный белок был дополнительно очищен с помощью ионообменной FPLC-хроматографии на ДЭАЭ-Toyopearl. Белок PKPI-B10 эффективно подавлял активность трипсина, значительно слабее ингибировал химотрипсин и не действовал на другие исследованные сериновые проте-иназы: эластазу из лейкоцитов человека, субтилизин Карлсберг и протеиназу К, а также на растительную цистеиновую протеиназу, папаин.