|
ИСТИНА |
Войти в систему Регистрация |
Интеллектуальная Система Тематического Исследования НАукометрических данных |
||
Cинтез в Escherichia coli и характеристика рекомбинантного эритропоэтина человека с дополнительным гепарин-связывающим доменомстатья
Статья опубликована в журнале из списка RSCI Web of Science
Статья опубликована в журнале из перечня ВАКСтатья опубликована в журнале из списка Web of Science и/или Scopus
Дата последнего поиска статьи во внешних источниках: 24 января 2020 г.
- Авторы: Карягина А.С., Грунина Т.М., Попонова М.С., Орлова П.А., Манских В.Н., Демиденко А.В., Струкова Н.В., Манухина М.С., Никитин К.Е., Лящук А.М., Галушкина З.М., Черепушкин С.А., Поляков Н.Б., Соловьев А.И., Жуховицкий В.Г., Третяк Д.А., Бокша И.С., Громов А.В., Лунин В.Г.
- Журнал: Биохимия
- Том: 83
- Номер: 10
- Год издания: 2018
- Издательство: ФГБУ "Издательство "Наука"
- Местоположение издательства: Москва
- Первая страница: 1504
- Последняя страница: 1522
- Аннотация: Синтезом в клетках Escherichia coli получен рекомбинантный эритропоэтин человека (EPO), несущий на N-конце дополнительный гепарин-связывающий белковый домен (HBD) из костного морфогенетического белка BMP-2. Разработана схема выделения, очистки и рефолдинга, позволяющая получить высокоочищенный белок HBD-EPO со структурой, близкой к нативной, содержащей, как показано с помощью MALDI-TOF-масс-спектрометрического анализа, две дисульфидные связи. Белок обладает биологической in vitro активностью в пролиферативном тесте на линии клеток эритролейкемии человека TF-1, in vivo активностью в тесте по возрастанию количества ретикулоцитов в крови после подкожного инъекционного введения и проявляет местную ангиогенную активность при подкожной имплантации диска из деминерализованного костного матрикса (ДКМ) с иммобилизированным на нем HBD-EPO. Разработан количественный сэндвич-ИФА тест, основанный на использовании кроличьей поликлональной сыворотки и коммерческих моноклональных антител к эритропоэтину, позволяющий определять концентрацию белка HBD-EPO в растворе. Исследование фармакокинетики полученного эритропоэтина показало, что препарат сходен по характеристикам с другими эритропоэтинами, синтезированными в клетках бактерий. HBD-EPO обратимо связывается в физиологических условиях с деминерализованным костным матриксом (ДКМ), часто используемым в качестве остеопластического материала для лечения патологий костной ткани. Данные по связыванию HBD-EPO с ДКМ и проявляемому при его введении в организм местному ангиогенному эффекту позволяют надеяться на успех при использовании HBD-EPO, иммобилизированного на ДКМ, в экспериментах по регенерации костной ткани.
- Добавил в систему: Карягина-Жулина Анна Станиславовна