Управляемая коамплификация генов для получения рекомбинантных белков терапевтического назначения: исследование динамики инсерции и амплификации генетических кассет в геноме клеток яичника китайского хомячка при коэкспрессии пары совместимых плазмидстатья

Статья опубликована в журнале из списка RSCI Web of Science
Статья опубликована в журнале из перечня ВАК
Статья опубликована в журнале из списка Web of Science и/или Scopus
Дата последнего поиска статьи во внешних источниках: 24 января 2020 г.

Работа с статьей


[1] Управляемая коамплификация генов для получения рекомбинантных белков терапевтического назначения: исследование динамики инсерции и амплификации генетических кассет в геноме клеток яичника китайского хомячка при коэкспрессии пары совместимых плазмид / С. Ковнир, Н. Орлова, Ю. Ходак и др. // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. — 2017. — Т. 163, № 2. — С. 211–215. Семейство векторов p1.1 на основе некодирующих областей конститутивно-экспрессирующегося гена клеток китайского хомячка EEF1A и конкатемера терминального повтора вируса Эпштейна—Барр позволяет увеличить частоту интеграции целевых плазмид в геном и быстро амплифицировать целевые гены в геноме. На примере флюоресцентных белков (eGFP и mCherry) было показано, что векторы семейства p1.1 с селекционными маркерами дигидрофолатредуктазы и глутаминсинтетазы при котрансфекции в клетки линии CHO DG44 позволяют получить поликлональную популяцию клеток, в которой около 70% клеток экспрессируют оба гена. Последующая одностадийная амплификация интегрированных в геном клеток генетических кассет под действием метотрексата позволяет увеличить уровень экспрессии обоих интегрированных генов до 8.2% eGFP, 9.9% mCherry от общего белка. Разработанный метод может быть использован для получения стабильных линий-продуцентов функциональных гетеродимерных белков, в частности, гормонов и терапевтических антител.

Публикация в формате сохранить в файл сохранить в файл сохранить в файл сохранить в файл сохранить в файл сохранить в файл скрыть