| 1 |
1 января 2014 г.-31 декабря 2014 г. |
Роль митохондрий в формировании ответа эндотелиальных клеток на воспалительные стимулы |
| Результаты этапа: Эндотелиальные клетки сосудов играют ключевую роль в поддержании гомеостаза сердечно-сосудистой системы. Хроническое повышение в крови количества воспалительных цитокинов, в первую очередь фактора некроза опухолей альфа (ФНО), является одним из существенных фактора риска возникновения эндотелиальных дисфункций.
Используя митохондриально-направленные антиоксиданты на основе пластохинона и проникающих катионов (семейство SkQ), мы исследовали роль митохондриальных активных форм кислорода (АФК) в развитии апоптоза и перестройках цитоскелета эндотелиальных клеток, индуцированных ФНО.
Митохондриально-направленный антиоксидант SkQ, как и классические антиоксиданты N-ацетилцистеин и Trolox, существенно подавляли апоптоз, вызванный высокими дозами ФНО. Их действие было направлено на подавление выхода цитохрома с из митохондрий в цитоплазму, расщепление каспазы-3 и ее субстраты PARP. Механизм защитного действия SkQ может быть связан с его способностью ингибировать перекисное окисление липидов внутренней мембраны митохондрий, в первую очередь кардиолипина. С другой стороны мы показали, что длительная обработка SkQ приводит к повышению уровня Bcl-2, и уменьшению уровней Bax и p53 [1]. Мы показали, что SkQ не влияет на экспрессию мРНК Bcl-2, но усиливает его фосфорилирование, что способствует подавлению убиквитинирования этого белка. Таким образом, SkQ предотвращает вызванный ФНО протеолиз Bcl-2.
Мы предполагаем, что SkQ может влиять на активацию редокс-чувствительных стресс-киназ, которые участвуют в фосфорилировании белков семейства Bcl-2.
В нетоксичных концентрациях ФНО способен вызывать разборку периферического кольцевого пучка актина и ассоциированных с ним межклеточных контактов, а также формирование стресс-фибрилл, что способствует проникновению высокомолекулярных медиаторов воспаления из кровотока. SkQ предотвращали вызванное ФНО снижение об-щего уровня белка межклеточных адгезионных контактов VE-кадгерина, разборку меж-клеточных адгезионных контактов [1].
Таким образом, было показано, что ФНО-зависимое повреждение эндотелиальных клеток во многом зависит от продукции АФК в митохондриях, что указывает на перспективность изучения ангиопротекторного действия SkQ. |
| 2 |
1 января 2015 г.-31 декабря 2015 г. |
Роль митохондрий в формировании ответа эндотелиальных клеток на воспалительные стимулы |
| Результаты этапа: Были получены доказательства того, что в культуре эндотелиальных клеток
митохондрии регулируют VE-кадгериновую проницаемость, вызванную ФНО (фактором
некроза опухоли). Также показано, что митохондриально-направленный антиоксидант
SkQ, также как и классические антиоксиданты, предотвращают вызванное ФНО
появление в среде 90кДа фрагмента внеклеточного домена VE-кадгерина. Была показана
вовлеченность металлопротеаз в митохондриально-зависимое снижение уровня VE-
кадгерина. Оценено влияние SkQ на активацию некоторых ФНО- зависимых сигнальных
путей, которые регулируют экспрессию генов, в том числе и металлопретеаз.
Ранее было показано, что митохондриально-направленные антиоксиданты
существенно подавляли апоптоз, вызванный высокими дозами ФНО. Их действие было
направлено на подавление выхода цитохрома с из митохондрий в цитоплазму,
расщепление каспазы-3 и ее субстраты PARP.
Таким образом, было показано, что ФНО-зависимое повреждение эндотелиальных
клеток во многом зависит от продукции АФК в митохондриях, что указывает на
перспективность изучения ангиопротекторного действия SkQ. |
