ИСТИНА

Проект посвящен исследованию структурной организации вирионов и невирионной транспортной формы вируса штриховатой мозаики ячменя (ВШМЯ) из рода Hordeivirus. В ходе проекта планируется получить методами анализа структуры белков подтверждения ранее разработанной нами модели трехмерной структуры белка оболочки ВШМЯ и картировать его неупорядоченные участки. Кроме того будет выделены, накоплены и структурно проанализированы невирионные транспортные РНП ВШМЯ из инфицированных растений. Результаты, полученные в ходе данного проекта, с одной стороны помогут прояснить механизмы распространения вируса по растению, а с другой позволят рассматривать гордеивирусы, в качестве перспективных кандидатов на роль наноплатформ для создания новых разнообразных материалов для биомедицины

Данная работа посвящена изучению взаимосвязи структуры и функции РНП-формирующих белков гордеивирусов, а именно белка оболочки вируса штриховатой мозаики ячменя (ВШМЯ), образующего вирионы, и белка TGBp1, участвующего в формировании транспортной формы вируса. Несмотря на то, что оба белка являются ключевыми для успешного развития гордеивирусной инфекции, со структурной точки они охарактеризованы недостаточно хорошо, в то время как изучение их структуры позволило бы лучше понять их значение в развитии вирусной инфекции. В ходе первого года нами были получены рекомбинантные варианты ВШМЯ штамма ND18 и охарактеризованы их инфекционные свойства. В результате было установлено, что делеции в белке оболочки ВШМЯ не влияют на характер развития инфекции, однако, уровень накопления таких вирусов низок и невозможно выделение вируса в количествах, необходимых для методов структурного анализа. Для решения этой проблемы нами получены химерные вирионы вируса табачной мозаики, белок оболочки которого был заменен на белок оболочки ВШМЯ. Полученные химерные вирионы по своим структурным характеристикам не имели видимых отличий от вирионов ВШМЯ дикого типа. Делеционные и точечные мутации различных участков белка оболочки химерного вируса показали, что, в отличие от вируса дикого типа, С-концевой участок белка оболочки важен для развития системной инфекции. Кроме того было продемонстрировано, что тирозин и изолейцин центральной поверхностной петли являются необходимыми для формирования вирионов, по всей видимости, участвуя в образовании межсубъединичных взаимодействий. Кроме того была продемонстрирована возможность использовать вирионы ВШМЯ, как биоматрицы для получения металлических наночастиц в экстрактах растений.