Митохондриальный фактор инициации трансляции 2: новая потенциальная цель терапии митохондриальных болезнейНИР

Mitochondrial translation initiation factor 2: a potential target of mitochondrial therapy

Источник финансирования НИР

грант РФФИ

Этапы НИР

# Сроки Название
1 2 апреля 2021 г.-15 ноября 2021 г. первый этап
Результаты этапа: В ходе работ на первом этапе выполнения проекта нами была получена линия клеток с делецией в гене MTIF2. Для получения этой клеточной линии мы использовали систему редактирования генома CRISPR-Cas9 и пару направляющих РНК для внесения делеции в первый экзон гена, приводящей к сбою рамки считывания. Хотя секвенирование участка гена, несущего делецию, подтверждало сбой рамки считывания, нами было принято решение подтвердить отсутствие функционального белка методом Вестерн блота. Для этого мы получили рекомбинантный белок, который использовали в качестве антигена для иммунизации лабораторных животных для получения антител к mtIF2, посколько они коммерчески недоступны.
2 25 декабря 2021 г.-15 февраля 2023 г. второй этап
Результаты этапа: Клетки нокаутных линий характеризуются дисфункцией митохондрий. У них снижены уровни клеточного дыхания и синтеза АТФ. Анализ состава и функций отдельных комплексов дыхательной цепи выявил снижение удельной активности комплексов I и V, а также снижение количества третьего комплекса. При этом наблюдаемые нарушения цепи окислительного фосфорилирования не связаны с нарушением митохондриальной трансляции. Делеция в гене MTIF2 не влияет на синтез митохондриально закодированных белков, как и на их стабильность. Все поставленные задачи были выполнены в полном объеме: линии с делецией в гене MTIF2 были получены, в клетках полученных линий был охарактеризован профиль митохондриальной трансляции, а также исследовано состояние комплексов окислительного фосфорилирования.

Прикрепленные к НИР результаты

Для прикрепления результата сначала выберете тип результата (статьи, книги, ...). После чего введите несколько символов в поле поиска прикрепляемого результата, затем выберете один из предложенных и нажмите кнопку "Добавить".