Комбинаторная платформа на основе химически модифицированных псевдоморфных частиц серебра для экспресс-диагностики биологически активных веществ методом спектроскопии гигантского комбинационного рассеянияНИР

Combinatorial platform based on chemically modified pseudomorphic silver particles for express diagnostics of biologically active substances by surface-enhanced Raman spectroscopy

Источник финансирования НИР

грант РНФ

Этапы НИР

# Сроки Название
1 15 июля 2020 г.-30 июня 2021 г. Развитие прецизионных химических методик получения полиэдрических частиц-предшественников сложной формы и морфологии, анализ процессов зародышеобразования и роста эмбриокристаллов в присутствии гранеселективной сорбции поверхностно-активных веществ
Результаты этапа: За отчетный период получено более 20 типовых образцов наноструктурированных полиэдрических частиц металлического серебра в виде суспензий в этаноле, содержащих поливинилпирролидон (ПВП). Варьированием концентраций реагентов (нитрата серебра (I), ПВП, аммиака), типа ПВП (разной молекулярной массы), температуры синтеза, а также заменой прекурсора с оксида на хлорид серебра (I) получены псевдоморфные частицы серебра в диапазоне размеров 50 – 500 нм, обладающих заданными октаэдрической, кубической или кубооктаэдрической формой, с размерами составляющих псевдоморфы наночастиц серебра в 5 – 20 нм. Полученные образцы объединены в 6 серий с различными предысториями синтеза: -«оксидная» предыстория – оксид серебра (I) в качестве частиц-предшественников: серия 1 – варьирование концентрации нитрата серебра (I) в диапазоне 10 – 100 мМ; 2 – количества ПВП с молекулярной массой 40 000 г/моль 0 – 5х10^(-2) г; 3 – количества ПВП с молекулярной массой 1 300 000 г/моль 5х10^(-4) – 5х10^(-2) г; 4 – объема раствора аммиака, добавленного на стадии травления, 5 – 50 мл; 5 – температуры синтеза 25 – 60 оС; -«хлоридная» предыстория – хлорид серебра (I) в качестве частиц-предшественников: серия 6 – варьирование концентрации нитрата серебра (I) в интервале 10 – 100 мМ. Разработаны и оптимизированы 2 лабораторные методики получения псевдоморфов металлического серебра в рамках «формосохраняющих» химических реакций при использовании комбинаций реакций травления и восстановления полиэдрических частиц-предшественников сложной формы и морфологии – оксида серебра (I) и хлорида серебра (I). Методики включают следующие стадии: 1) образование частиц-предшественников (оксида или хлорида серебра (I), соответственно) сложной формы в присутствии ПВП, 2) восстановление частиц-предшественников пероксидом водорода, 3) контролируемое по времени травление водным раствором аммиака. В рамках использования подхода «формосохраняющих» химических реакций с комбинацией реакций травления и восстановления частиц полиэдрических предшественников удалось добиться существенной «гибкости» в получении конечных частиц с заданным соотношением пористости и внешнего геометрического размера, описывающегося формой октаэдра или кубооктаэдров. Подход позволяет сочетать редокс-реакции формирования металлического серебра из оксида и хлорида с использованием аммиака (на стадии травления) и удаление части прекурсора в виде растворимого комплекса диаммиаката гидроксида или хлорида серебра (I). Сочетание скоростей гетерогенных реакций растворения (травления) и восстановления серебра позволяет добиться формирования псевдоморфов с высокой степень пористости, что может быть полезно в дальнейшем при проведении анализа аналитов с использованием спектроскопии гигантского комбинационного рассеяния (ГКР). Данная методика позволяет создавать фиксированную агрегатную структуру наночастиц серебра в объеме частицы-предшественника с контролируемой степенью пористости и улучшенным доступом аналитов к поверхности наночастиц – строительных блоков, из которых сформирован псевдоморф. Проведена характеризация фазового состава и размера областей когерентного рассеяния псевдоморфных частиц серебра (рентгенофазовый анализ – РФА), морфологии и размера частиц (растровая электронная микроскопия – РЭМ), оптических свойств (спектроскопия диффузного отражения в УФ-видимой области), функциональных характеристик (ГКР-спектроскопия люминесцентных красителей типа Родамин 6G в концентрациях 0.1 – 10 нМ). Анализ эффективности использования различных температурно-временных режимов (25 – 60 оС, 5 – 30 мин), концентрации реагентов (10 – 100 мМ AgNO3, 0,01 – 1 г/л ПВП разной молекулярной массы), согласно данным РЭМ, показал, что существенные различия в морфологии и размерах наблюдаются лишь при переходе к «хлоридному» способу получения полиэдрических частиц. Остальные параметры синтеза, в т.ч. использование ПВП различной молекулярной массы, не столь существенно сказываются на морфологии и вносят относительно небольшие изменения в геометрические характеристики полученных частиц. Проведение синтеза при температурах, превышающих комнатную (40, 60 оС), увеличивает разброс значений средних размеров псевдоморфных частиц. Использование в качестве приемов фокусировки частиц естественной седиментации или центрифугирования с использованием различных режимов (1000 – 4000 об/мин, 5 – 30 мин) позволяет существенно уменьшить исходный разброс частиц по размерам, однако в настоящий момент отклонение от среднего все еще превышает 20%. По данным РФА, практически все образцы являются однофазными (происходит образование металлического серебра кубической модификации Fm3 ̅m), хотя некоторые из образцов могут содержать примеси на уровне интенсивностей пиков РФА в 2 – 3%. В то же время, результаты анализа областей когерентного рассеяния (ОКР) образцов показывают, что все образцы состоят из блоков мозаики около 20 – 25 нм, кроме образцов с «хлоридной» предысторией (размер ОКР 12 нм). Данные блоки примерно на 1 – 1,5 порядка величины меньше видимого на РЭМ-изображениях геометрического размера полученных частиц. Оптические свойства псевдоморфов серебра исследованы методом СДО в УФ-видимом диапазоне – все полученные образцы характеризуются наличием полос плазмонного резонанса с максимумами в области 320 нм и 350 – 500 нм, что свидетельствует о наличии наночастиц серебра в составе псевдоморфов. Полученные с использованием СДО результаты согласуются с данными РЭМ и расчетами ОКР образцов. Полученные образцы демонстрируют ГКР-активность, что было продемонстрировано на примере люминесцентного красителя Родамина 6G в концентрациях 0.1 – 10 нМ (коэффициенты усиления сигнала комбинационного рассеяния составляли 10^5 – 10^8). В рамках проведения работ первого этапа опубликована 1 статья в журнале Q2 (Mendeleev Communications).
2 1 июля 2021 г.-30 июня 2022 г. Разработка и оптимизация экспериментальных подходов, позволяющих в рамках «формосохраняющих» химических реакций изменить фазовый состав частиц-предшественников и получить псевдоморфы металлического серебра, в том числе, при использовании комбинаций реакций травления и восстановления частиц полиэдрических предшественников
Результаты этапа: К основным результатам выполнения второго этапа проекта относятся: -Результаты оптимизации экспериментальных методик получения псевдоморфных частиц серебра с высокой ГКР-активностью путем варьирования концентраций реагентов (AgNO3, ПВП, NH4OH), типа ПВП (разной молекулярной массы), температуры синтеза, а также заменой прекурсора с оксида на хлорид серебра (I). -Результаты мониторинга функциональных характеристик полученных вариантов псевдоморфных частиц серебра с использованием люминесцентных красителей (метиленового синего); установление основных параметров получения материалов (предыстории синтеза), приводящих к формированию оптимальной морфологии и к высокой ГКР-активности псевдоморфных наноструктурированных частиц серебра в форме октаэдров; создание экспериментальных вариантов ГКР-платформы для аналитических систем высокочувствительного и воспроизводимого оптического анализа. -Результаты систематического анализа молекул-линкеров и молекул-«ловушек» аналитов, иммобилизованных на поверхности псевдоморфных частиц за счет взаимодействия с серебром тиольных и аминных «якорных» групп. Установлено, что микрогетерогенный химический ансамбль псевдоморфов, симбатно модифицированный несколькими молекулами-линкерами (тиолами и аминами) существенно улучшает аналитические характеристики системы для ГКР-анализа за счет синергетического взаимодействия модифицирующих добавок с аналитами. Часть добавок выступает в виде «ловушек» с линкерами к специфическим целевым аналитам для их дальнейшего использования в составе аналитической ГКР-системы. Другая часть может быть использована для резонансного усиления сигнала за счет эффекта переноса заряда между донорными и акцепторными молекулами, «пришитыми» к поверхности псевдоморфов серебра. -Результаты исследования процессов взаимодействия аналитов с ансамблем химически модифицированных частиц-псевдоморфов и формирования спектрального сигнала в условиях проведения ГКР-анализа в сложных матрицах; разработка практических решений по создания целевых ГКР-систем и лабораторных методик измерений для их дальнейшего использования. Продемонстрировано, что комплексы переноса заряда могут обеспечить дополнительное усиление ГКР-сигнала благодаря переносу заряда и участию электронных компонентов в резонансном ГКР. В ходе выполнения проекта решен ряд практических задач, в том числе разработаны подходы по химическому модифицированию псевдоморфов для создания специализированных мест присоединения – «ловушек» целевых аналитов, предложена методика создания микрогетерогенных аналитических систем для ГКР-анализа на основе направленного комбинирования различных фракций псевдоморфных частиц с заданными параметрами, даны практические предложения по созданию ГКР-экспресс-систем с высокими чувствительностью и специфичностью анализа, с коэффициентом усиления более 10^6 – 10^7.

Прикрепленные к НИР результаты

Для прикрепления результата сначала выберете тип результата (статьи, книги, ...). После чего введите несколько символов в поле поиска прикрепляемого результата, затем выберете один из предложенных и нажмите кнопку "Добавить".