ИСТИНА

Планируется провести на цитогеронтологической модели "стационарного старения" тестирование некоторых известных геропротекторных препаратов, оказывающих влияние на продолжительность и качество жизни модельных животных объектов, а также некоторых потенциальных геропротекторов. Основным способом оценки будет построение кривых выживания клеточных культур в стационарной фазе роста и их последующий анализ, в качестве дополнительной характеристики будет определяться проявление в клетках известных биомаркёров "клеточного возраста". Предполагается исследование на той же модельной системе влияния нескольких метаболических ингибиторов и стрессирующих факторов. В некоторых случаях будет изучено влияние геропротекторов на подвергнутые стрессу или воздействию ингибиторов непересеваемые клеточные культуры.

It is planned to conduct, using cytogerontological "stationary phase aging" model, testing of some well-known geroprotective drugs which affect the duration and quality of life of model animal objects, as well as some potential geroprotectors. The main method of assessment will be the construction of survival curves of cell cultures in the stationary phase of growth and their subsequent analysis, the manifestation of known "cell age" biomarkers in the cells will be determined as an additional characteristic. The study on the same model system is supposed to evaluate influence of several metabolic inhibitors and stressors. In some cases, the effect of geroprotectors on stress- or inhibitory-treated nonsubcultured cell cultures will be studied.

1. Усовершенствование модели “стационарного старения” клеточных культур – в частности, условий культивирования и поддержания клеток в длительном эксперименте. 2. Анализ кинетики вымирания и построение кривых выживания культуры клеток в опытах с разными условиями культивирования и в экспериментах по определению геропротекторных свойств изучаемых препаратов. 3. Внедрение демографических подходов в математический анализ продолжительности жизни культуры клеток с расчетом соответствующих показателей. 4. Поиск потенциальных геропротекторных препаратов с помощью разрабатываемой модели. 5. Поиск подходящих для модели биомаркёров клеточного “возраста”. 6. Тестирование разных способов определения жизнеспособности клеток; выбор способа, оптимального для экспериментов с использованием модели “стационарного старения” культур клеток. 7. Опубликование статей в рецензируемых научных журналах (2-3 статьи в год), выступление на международных конференциях с докладами (2-3 конференции международного охвата в год).

Тема является продолжением Гостемы АААА-А16-116021660098-8 (2016-2020 гг.) "Исследование механизмов старения и тестирование геропротекторов или геропромоторов в экспериментах на клеточных культурах и клетках зародышевого пути". Проведены эксперименты по сравнению нескольких способов оценки жизнеспособности "стационарно стареющих" культивируемых клеток, в том числе методом определения способности клеток к образованию колоний. Установлено, что для подсчёта количества живых и мёртвых клеток необходимо снимать адгезивные культуры клеток с поверхности роста, чтобы избежать искажения получаемых результатов. К данным о кинетике вымирания клеток применён новый способ их обработки, который позволяет проводить сравнение кривых выживания и определять показатели, характеризующие продолжительность жизни клеток в непересеваемой культуре. Для математического моделирования и расчётов разработаны две компьютерные программы. Подобраны оптимальные условия культивирования для проведения экспериментов с использованием модели "стационарного старения". Подробно изучено влияние экзогенного 8-оксо-2’-дезоксигуанозина на пролиферацию и "стационарное старение" культивируемых клеток китайского хомячка B11-dii FAF28. Определены локализация накопления экзогенного 8-оксо-2'-дезоксигуанозина в клетках, а также динамика поглощения ими этого соединения из культуральной среды. Установлено, что препарат снижает среднюю продолжительность жизни культуры клеток на 6%. Проведено исследование, направленное на определение митогенных и цитотоксических свойств двух потенциальных геропротекторов – метформина и рапамицина. Обнаружены геропротекторные свойства у изотонического препарата “Квинтон” – он увеличивает среднюю и максимальную продолжительность жизни культуры клеток на 7% и 11% соответственно.