В связи с техническими работами в центре обработки данных, возможность загрузки и скачивания файлов временно недоступна.
 

Исследование молекулярных механизмов зрения и молекулярных основ зрительных патологий. Белки сетчатки и других тканей глаза при офтальмологических заболеваниях и иных патологических состояниях.НИР

Investigation of the molecular mechanisms of vision and molecular bases of visual diseases. Proteins from retina and other ocular tissues in ophthalmological diseases and other pathological conditions.

Источник финансирования НИР

госбюджет, раздел 0110 (для тем по госзаданию)

Этапы НИР

# Сроки Название
1 1 января 2020 г.-31 декабря 2020 г. Исследование молекулярных механизмов зрения и молекулярных основ зрительных патологий. Белки сетчатки и других тканей глаза при офтальмологических заболеваниях и иных патологических состояниях.
Результаты этапа: Определен механизм, лежащий в основе взаимодействия нейронального кальциевого сенсора (НКС) сетчатки и ЦНС – белка NCS-1 – с клеточными (в том числе, фоторецепторными) мембранами. Показана ключевая роль миристоильной группы NCS-1 в этом механизме, а также продемонстрировано предпочтительное связывание им отрицательно заряженных фосфолипидов, модулируемое с участием N-концевых остатков лизина белка. Впервые продемонстрировано высокоспецифичное узнавание NCS-1 сигнальных фосфоинозитидов, в особенности фосфатидилинозитол-3-фосфата, связывание которого происходит с участием специального структурного сайта, расположенного в N-концевом домене белка. Полученные данные указывают на участие NCS-1 в сигнальных путях, регулируемых фосфоинозитидами, в том числе, в фоторецепторных клетках позвоночных животных. Разработан новый метод выделения различных НКС, который включает процедуру разделения миристоилированных и немиристоилированных форм этих белков и обеспечивает получение их полностью миристоилированных препаратов. Метод не нарушает структуру НКС и их способность связывать ионы кальция, и может быть применен для выделения самых разных миристоилированных белков. Сконструировано два пептидных ингибитора цитеиновых катепсинов человека и оценена их фармакологическая активность в отношении клеток рака почки. Показано, что применение полученных пептидов должно снижать агрессивность опухолевого процесса, однако может оказывать негативное влияние на общую экспрессию указанных протеаз в тканях.
2 1 января 2021 г.-31 декабря 2021 г. Исследование молекулярных механизмов зрения и молекулярных основ зрительных патологий. Белки сетчатки и других тканей глаза при офтальмологических заболеваниях и иных патологических состояниях.
Результаты этапа: В работе впервые определены значения редокс-потенциала дисульфидной связи димера белка ЦНС/сетчатки – нейронального кальциевого сенсора-1 (NCS-1), которые в случае его Ca2+-связанной формы находятся в диапазоне от -100 мВ до -220 мВ, в то время как для Mg2+-связанной формы не превышают -180 мВ. Сделан вывод, что в окисляющих условиях, возникающих в клетке, оба конформера NCS-1 могут частично существовать в виде дисульфидного димера, однако связывание кальция увеличивает вероятность образования этой формы белка. Защищена кандидатская диссертация на тему “Нейрональный кальциевый сенсор-1 в нормальной и патологической фоторецепторных системах”. Разработан высокочувствительный иммунологический метод с использованием микрочипов и магнитных частиц, подходящий для детекции следовых количеств онконевральных антигенов – рековерина и аррестина-1 – в биологических жидкостях. Определен предел обнаружения исследуемых антигенов в моче, который составил 0,1 пг/мл для обоих белков, что значительно превышает эффективность стандартной процедуры ИФА. Разработан метод множественного тестирования указанных белковых маркеров и показана его применимость для ранней неинвазивной диагностики онкологических заболеваний, таких как рак мочевого пузыря. Продемонстрирована противовоспалительная активность митохондриально-адресованного антиоксиданта ПДТФ (SkQ1) на модели бактериального увеита. Показано, что премедикация глаза с использованием этого препарата предотвращает развитие гистологических (повышение содержания лейкоцитов в передней камере глаза) и биохимических (повышение уровней интерлейкина 6, простагландина E2 и малонового диальдегида в водянистой влаге) признаков внутриглазного воспаления, индуцированного ЛПС. Результаты работы представлены на международной конференции и опубликованы в 2-х статьях в высокоимпактных международных журналах, индексируемых WoS/Scopus/РИНЦ.
3 1 января 2022 г.-31 декабря 2022 г. Исследование молекулярных механизмов зрения и молекулярных основ зрительных патологий. Белки сетчатки и других тканей глаза при офтальмологических заболеваниях и иных патологических состояниях.
Результаты этапа: Проведен сравнительный анализ Zn2+-связывающих свойств белков сетчатки, относящихся к семейству НКС, включая VILIP1, NCLD, рековерин, GCAP1 и GCAP2. Впервые показано, все они способны координировать цинк, однако с разной аффинностью, стехиометрией и конформационными эффектами. Высказано предположение, что белки НКС могут опосредовать взаимосвязь между Ca2+-зависимыми и Zn2+-зависимыми сигнальными путями в нейронах в норме, а также при развитии нейродегенеративных заболеваний, связанных с нейротоксическими эффектами цинка, таких как болезнь Альцгеймера и глаукома. Показано, что взаимодействие рековерина с каркасным белком кавеолином-1 – интегральным компонентом мембранных рафт-структур – является редокс-зависимым процессом, поскольку регулируется в условиях окислительного стресса за счет фосфорилирования кавеолина-1 тирозинкиназой Src, а также окисления рековеина с образованием дисульфидного димера и окисленного мономера белка. Высокоаффинное взаимодействие окисленного рековерина с кавеолином-1 может нарушать светозависимую транслокацию белка в фоторецепторных клетках, тем самым снижая эффективность десенситизации родопсина и стимулируя окислительный стресс – характерные черты ВМД. Продемонстрировано диагностическое значение онконевральных (раково-сетчаточными) антигенов рековерина и аррестина в качестве новых неинвазивных биомаркеров урологических онкозаболеваний. Показана применимость разработанного ранее высокочувствительного мультиплексного иммуноаналитического метода с использованием магнитных частиц для детекции указанных биомаркеров в образцах биологических жидкостей (моча, сыворотка крови) пациентов с почечно-клеточным раком, раком мочевого пузыря и раком предстательной железы. Полученные результаты могут стать основой для создания новых подходов к диагностике, мониторингу рецидивов и наблюдению за ходом лечения таких заболеваний. Результаты работы представлены на международной конференции и опубликованы в 4-х статьях в высокоимпактных международных журналах, индексируемых WoS/Scopus/РИНЦ.
4 1 января 2023 г.-31 декабря 2023 г. Исследование молекулярных механизмов зрения и молекулярных основ зрительных патологий. Белки сетчатки и других тканей глаза при офтальмологических заболеваниях и иных патологических состояниях.
Результаты этапа:
5 1 января 2024 г.-31 декабря 2024 г. Исследование молекулярных механизмов зрения и молекулярных основ зрительных патологий. Белки сетчатки и других тканей глаза при офтальмологических заболеваниях и иных патологических состояниях.
Результаты этапа:

Прикрепленные к НИР результаты

Для прикрепления результата сначала выберете тип результата (статьи, книги, ...). После чего введите несколько символов в поле поиска прикрепляемого результата, затем выберете один из предложенных и нажмите кнопку "Добавить".

Прикрепленные файлы


Имя Описание Имя файла Размер Добавлен