|
ИСТИНА |
Войти в систему Регистрация |
Интеллектуальная Система Тематического Исследования НАукометрических данных |
||
Внутриклеточное распределение и метаболизм «меченных» аналогов стеринов в клеточных системах, экспрессирующих цитохромы P450 НИР
Intracellular distribution and metabolism "tagged" analogues of sterols in cell systems expressing cytochrome P450
- Руководитель НИР: Новикова Л.А.
- Участники НИР: Ефимова В.С., Исаева Л.В., Лабудина А.А., Ломов Н.А., Рубцов М.А.
- Подразделение: Научно-исследовательский институт физико-химической биологии имени А.Н.Белозерского
- Срок исполнения: 1 января 2016 г. - 31 декабря 2017 г.
- Номер договора (контракта, соглашения): 16-54-00139/16
- Номер ЦИТИС: АААА-А16-116061710097-1
- Тип: Фундаментальная
- Приоритетное направление научных исследований: другое
- ПН России: Науки о жизни
- Направление технологического прорыва России: Медицинские технологии и лекарственные средства
-
Ключевые слова:
флуоресцентные аналоги холестерина, трансгенные микроорганизмы, цитохром р450 cyp11a1, рекомбинантные белки, стероидогенез
-
Описание:
Предлагаемый проект будет выполняться в сотрудничестве с белорусскими коллегами, представляющими Научно-исследовательский институт физико-химических проблем БГУ. В рамках проекта предполагается провести несколько групп экспериментов, часть из которых будет выполнена белорусским партнером. Общей целью проекта является анализ путей транспорта и метаболизма флуоресцирующих и алкиновых производных стероидов (ФПС и АПС соответственно) в различных типах клеток, экспрессирующих цитохром P450 CYP11A1. Некоторые известные коммерчески доступные и разработанные белорусскими коллегами флуоресцентные стероиды (флуоресцентные аналоги холестерина, ФАХ) могут связываться в активном центре трансформирующего холестерин цитохрома CYP11A1 вследствие сходства их структур с природными субстратами этого белка. Основная идея проекта состоит в использовании данного свойства «меченных» аналогов стеринов для изучения фолдинга и внутриклеточного распределения цитохрома CYP11A1 в клетках исследуемых трансгенных организмов и выявления новых деталей катализа трансформации стероидов цитохромом CYP11A1. Планируемый синтез и использование производных 3бета-гидроксистероидов (ФПС и АПС) позволит выявить детали их превращения CYP11A1 и исследовать возможности их применения для изучения биорегуляторных свойств стероидогенных ферментов. Сравнительный анализ параметров поглощения и внутриклеточного распределения ФПС и АПС в объектах различных таксономических групп (бактерии, дрожжи, клетки человека) и влияния на них ряда веществ позволит получить новые данные о механизмах транспорта стероидов в клетки и внутриклеточном транспорте. Данные, полученные в рамках предлагаемого к выполнению проекта, позволят усовершенствовать современные концепции дизайна ФПС для целей контролируемой модуляции биопроцессов с участием стероидов, дизайна трансгенных микроорганизмов для целей биотехнологического превращения стероидов, а также выявить новые регуляторы процессов поглощения/метаболизма стероидов, имеющие потенциал в качестве интенсификаторов биотехнологических процессов и/или фармакологических агентов.
- Добавил в систему: Новикова Людмила Александровна
Соисполнители НИР
| НИИ ФХП БГУ | Соисполнитель |
Источник финансирования НИР
| грант РФФИ |
Этапы НИР
| # | Сроки | Название |
| 1 | 1 января 2016 г.-31 декабря 2016 г. | Внутриклеточное распределение и метаболизм «меченных» аналогов стеринов в клеточных системах, экспрессирующих цитохромы P450 |
| Результаты этапа: Проведено исследование возможности поглощения ряда флуоресцирующих аналогов холестерина (ФАХ) клетками E. coli, их стабильности в клетках и внутриклеточного распределения. Обнаружено, что флуоресцентные соединения 25-НБД- холестерин (25NC), 22-НБД-холестерин (22NC), 5?-H,3?-H-изомер 3-(НБД-aминo)-холестана (3NC) и 20?-H-изомер 20-(НБД- aминo)-прегн-5-ен-3?-ола (20NP), а также 26,27-динорхолест-5-ен-24-ин-3?,20-диол (Nat) проникают в клетки E. coli, локализуются в мембранах и липидных каплях и остаются стабильными в течение 48 часов. Это позволяет предполагать, что в дальнейшем они могут быть использованы в экспериментах с применением штаммов E. coli, экспрессирующих белки энзиматических систем, осуществляющих трансформацию стероидов. С использованием проточной цитометрии и флуоресцентной спектроскопии обнаружено, что эффективность накопления в клетках ФАХ зависит от структуры стероида. Впервые показано, что ФАХ 22NC и Nat подвергаются биотрансформации рекомбинантным цитохромом Р450scc, присутствующим в клетках E. coli, экспрессирующих белки стероидогенной системы цитохрома P450scc быка. С использованием метода ВЭЖХ впервые показано, что 22-НБД-холестерин может быть использован в качестве субстрата для стероидогенной Р450scc-системы, реконструированной в клетках млекопитающих, что представляет интерес для фундаментальных и прикладных исследований. | ||
| 2 | 1 января 2017 г.-26 марта 2018 г. | Внутриклеточное распределение и метаболизм «меченных» аналогов стеринов в клеточных системах, экспрессирующих цитохромы P450 |
| Результаты этапа: | ||
Прикрепленные к НИР результаты
Для прикрепления результата сначала выберете тип результата (статьи, книги, ...). После чего введите несколько символов в поле поиска прикрепляемого результата, затем выберете один из предложенных и нажмите кнопку "Добавить".