Сравнительный молекулярно-биологический анализ эволюционно-консервативной сигнальной системы растений, животных и человека, функционирующей на основе пектинметилэстеразы и метаболического метанолаНИР

Comparative molecular biological analysis of evolutionary-conservative signal system of plants, animals and humans functioning on the basis of pectin methylesterase and metabolic methanol

Источник финансирования НИР

грант РФФИ

Этапы НИР

# Сроки Название
1 1 октября 2018 г.-30 сентября 2020 г. Сравнительный молекулярно-биологический анализ эволюционно-консервативной сигнальной системы растений, животных и человека, функционирующей на основе пектинметилэстеразы и метаболического метанола
Результаты этапа: 1. Проведены исследования морфологии и ультраструктурных особенностей трансгенных растений табака, суперэкспрессирующих ген NtPME, а также получены трансгенные растения табака, экспрессирующие GUS под контролем промотора proNtPME (proNtPME-GUS). Ранее мы получили линии табака, в которые ввели дополнительные копии, выделенного нами гена NtPME под контролем промотора 35S вируса мозаики цветной капусты. Для всех полученных линий характерна карликовость и двукратное увеличение содержания метанола в соке листьев. Мы заключили, что повышенная экспрессия гена NtPME приводит к повышенному синтезу метанола и сопровождается карликовостью растений с резкими морфологическими изменениями клеток. Также для определения влияния стрессовых воздействий на промотор гена NtPME (ProNtPME) мы получили стабильно трансформированные растения табака, экспрессирующие GUS под контролем промотора ProNtPME. 2. Выделены элементы бактериальных нуклеомодулинов, способствующих транскрипционной активизации гена γ-тионина. Нами получены последовательности (а) NLS VirE3 A. tumefaciens, (б) предсказанный NLS PopP2 Ralstonia solanacearum и созданы соответствующие генноинженерные конструкции, в которых под контролем 35S-промотора находится последовательность, кодирующая GFP слитый с NLS VirE3 (35S-GFP:NLS_VirE3) и NLS_PopP2 (35S-GFP:NLS_PopP2). Выделен промотор гена γ-тионина, как первый шаг создания экспериментальной системы тестирования стимулов и факторов, воздействующих на экспрессию гена γ-тионина. В результате проведения экспериментов по оценке способности NLS различного происхождения стимулировать экспрессию GUS, направляемую Pro-γThio, в транзиентной системе мы выяснили, что GFP, слитый как с NLS протимозина α человека (NLSpTα), так и с NLS VirE3 A. tumefaciens, стимулировал продукцию GUS, направляемую Pro-γThio, при этом NLS VirE3 вызвал более значительное увеличение уровня продукции GUS. В результате проведенной работы мы пришли к выводу, что накопление мРНК γ-тионина может стимулировать защитную реакцию, вызванную введением в растительную клетку чужеродного ядерного белка (нуклеомодулина). 3. Разработан и оптимизирован протокол подготовки веществ и протокол эксперимента на лабораторных животных, цель которого определить роль химических модификаций в проявлении функции АЛК по поддержанию ФА на низком уровне в сыворотке крови. 4. Проведено исследование влияния АЛК на уровень эндогенного формальдегида (ФА) в крови добровольцев. Нами установлено, что АЛК эффективно снижает уровень эндогенного ФА в сыворотке крови человека, одновременно увеличивая содержание мРНК альдегиддегидрогеназы 2 (ALDH2) в лейкоцитах. Мы установили, что благотворное влияние АЛК на пациентов с болезнью Альцгеймера может быть связано с ускоренной ALDH2-опосредованной детоксификацией и клиренсом ФА.

Прикрепленные к НИР результаты

Для прикрепления результата сначала выберете тип результата (статьи, книги, ...). После чего введите несколько символов в поле поиска прикрепляемого результата, затем выберете один из предложенных и нажмите кнопку "Добавить".