ИСТИНА

С применением митохондриально-направленного антиоксиданта SkQ1 и его аналога без антиоксидантной группы (контроль), С12ТРР+, было показано, что дыхательный взрыв нейтрофилов, индуцированный различными стимулами, происходит при участии митохондриальных активных форм кислорода (мтАФК). Роль мтАФК в этом процессе была доказана методом, регистрирующим суммарные АФК. Анализ образования нейтрофильных внеклеточных ловушек или НЕТоза показал, что источником АФК, являющихся интермедиатами этого процесса, может быть не только NADPH оксидаза, но и митохондрии. Нами было показано, что НЕТоз, индуцированный ФМА, происходит в основном за счет оксидаза-зависимых АФК, а мтАФК играют только вспомогательную роль и в отсутствие интактного фермента в НЕТозе не участвуют. Мы впервые показали, что кальциевые ионофоры способны индуцировать как NADPH-оксидаза-зависимый, так и оксидаза-независимый НЕТоз. Последний может происходить с участием мтАФК в отсутствие интактной NADPH-оксидазы, что является важным фактором в лечении заболеваний, обусловленных мутациями фермента (ХГБ), а также его вторичными дефицитами. С использованием ингибиторов митохондриальной поры (mPTP), специфически блокирующих основные регуляторные компоненты поры, CypD и ANT, мы впервые обнаружили, что mPTP участвует в передаче сигнала от митохондрий к NADPH-оксидазе при активации клеток кальциевыми ионофорами, но не ФМА. Применение ингибиторов протеинкиназы C показало PKC-зависисую активацию NADPH-оксидазы при стимуляции нейтрофилов кальциевыми ионофоромами. В работе впервые было показано, что белок DRP1, являющийся классическим активатором фрагментации митохондрий, участвует в НЕТозе, реализуя свои канонические функции. В то же время, DRP1 вовлечен в процесс регуляции окислительного взрыва, индуцированного кальциевыми ионофорами благодаря активации митохондриальной поры. Мы также показали участие АТФ-зависимых калиевых каналов в окислительном взрыве, но не в НЕТозе, нейтрофилов здоровых доноров.

Using the mitochondrial-targeted antioxidant SkQ1 and its analogue without the antioxidant group (control), C12TPP+, it was shown that a respiratory burst of neutrophils induced by various stimuli occurs with the participation of mitochondrial reactive oxygen species (mtROS). The role of mtROS in this process was proven by the method that records the total ROS formation. Analysis of the neutrophil extracellular traps formation or NETosis showed that the source of ROS, which are the intermediates of this process, can be not only NADPH oxidase, but also mitochondria. We showed that NETosis induced by PMA occurs mainly due to oxidase-dependent ROS, and mtROS play only an accessory role and do not participate in NETosis in the absence of an intact enzyme. We showed for the first time that calcium ionophores are able to induce both NADPH oxidase-dependent and oxidase-independent NETosis. The latter can occur with the participation of mtROS in the absence of intact NADPH oxidase, which is an important factor in the treatment of diseases caused by mutations of the enzyme (CGD), as well as by its secondary deficiencies. Using mitochondrial pore inhibitors (mPTP) specifically blocking the main regulatory components of the pore CypD and ANT, we discovered for the first time that mPTP is involved in signal transmission from mitochondria to NADPH oxidase when cells are activated by calcium ionophores, but not by PMA. Application of protein kinase C inhibitors showed a PKC-dependent activation of NADPH oxidase in the case of neutrophil stimulation with calcium ionophores. In our work we showed for the first time that the DRP1 protein, which is a classical activator of mitochondrial fragmentation, participates in NETosis realizing its canonical functions. At the same time, DRP1 is involved in the regulation of the oxidative burst induced by calcium ionophores due to the activation of the mitochondrial pore. We also showed the involvement of ATP-dependent potassium channels in the oxidative burst of healthy donors.

С применением митохондриально-направленного антиоксиданта SkQ1 и его аналога без антиоксидантной группы (контроль), С12ТРР+, было показано, что дыхательный взрыв нейтрофилов, индуцированный различными стимулами, происходит при участии митохондриальных активных форм кислорода (мтАФК). Роль мтАФК в этом процессе была доказана методом, регистрирующим суммарные АФК. Анализ образования нейтрофильных внеклеточных ловушек или НЕТоза показал, что источником АФК, являющихся интермедиатами этого процесса, может быть не только NADPH оксидаза, но и митохондрии. Нами было показано, что НЕТоз, индуцированный ФМА, происходит в основном за счет оксидаза-зависимых АФК, а мтАФК играют только вспомогательную роль и в отсутствие интактного фермента в НЕТозе не участвуют. Мы впервые показали, что кальциевые ионофоры способны индуцировать как NADPH-оксидаза-зависимый, так и оксидаза-независимый НЕТоз. Последний может происходить с участием мтАФК в отсутствие интактной NADPH-оксидазы, что является важным фактором в лечении заболеваний, обусловленных мутациями фермента (ХГБ), а также его вторичными дефицитами. С использованием ингибиторов митохондриальной поры (mPTP), специфически блокирующих основные регуляторные компоненты поры, CypD и ANT, мы впервые обнаружили, что mPTP участвует в передаче сигнала от митохондрий к NADPH-оксидазе при активации клеток кальциевыми ионофорами, но не ФМА. Применение ингибиторов протеинкиназы C показало PKC-зависисую активацию NADPH-оксидазы при стимуляции нейтрофилов кальциевыми ионофоромами. В работе впервые было показано, что белок DRP1, являющийся классическим активатором фрагментации митохондрий, участвует в НЕТозе, реализуя свои канонические функции. В то же время, DRP1 вовлечен в процесс регуляции окислительного взрыва, индуцированного кальциевыми ионофорами благодаря активации митохондриальной поры. Мы также показали участие АТФ-зависимых калиевых каналов в окислительном взрыве, но не в НЕТозе, нейтрофилов здоровых доноров.