ИСТИНА

Способ получения препаративных количеств антигенов флоэмно-ограниченных вирусов Изобретение относится к биотехнологии и фундаментальной вирусологии. 1. Способ получения препаративных количеств вирусного антигена, а именно целевого вирусного белка, в составе химерных вирусных частиц, имитирующих вирионы вируса скручивания листьев картофеля (ВСЛК, PLRV) для получения антисыворотки к ВСЛК, включающий следующие стадии: а) создание рекомбинантной ДНК, содержащую кДНК вируса просветления жилок турнепса (ВПЖТ, TVCV), который принадлежит к тобамовирусам, и который способен накапливаться в количестве до 7 грамм на 1 кг зараженного материала. кДНК ВПЖТ находится под контролем растительного промотора, на ее конце имеется терминатор транскрипции, а ген белка оболочки ВПЖТ заменен на ген мажорного белка оболочки ВСЛК; б) создание агробактериального вектора (плазмиды) pCambia 1300, способного встраиваться в геном растения-хозяина;. В) рамножение химерного вируса, состоящего из вируса Полученной плазмидой была трансформирована агробактерия штамма GV3101, способная эффективно встраивать кДНК химерного вируса в хромосому растительной клетки. После транскрипции РНК химерного вируса начинает реплицироваться с помощью тобамовирусной полимеразы, и химерный вирус распространяется по всем тканям растения, не ограничиваясь флоэмой. Выделение химерных вирусных частиц из растения в целом проще, чем выделение ВСЛК, который нужно экстрагировать из жестких проводящих пучков. Полученный таким образом препарат получается химически более чистым. К полученному препарату химеры ВСЛК была получена антисыворотка, пригодная для диагностического определения инфицированных ВСЛК растений.