![]() |
ИСТИНА |
Войти в систему Регистрация |
Интеллектуальная Система Тематического Исследования НАукометрических данных |
||
Изобретение относится к области биотехнологии, а именно к набору векторов экспрессии для получения белков в клетках млекопитающих. Набор содержит вектор экспрессии, представляющий собой вирусную частицу аденоассоциированного вируса (AAV), имеющую капсидные белки AAV, в которую упакована в качестве генома одноцепочечная молекула ДНК, на концах которой располагаются ITR AAV, внутри ITR AAV последовательно расположены промотор первого фактора элонгации эукариот EF1 альфа, последовательность гистидиновой метки, сигнал внутриклеточной локализации в ядре 5’-SV40 NLS, кодон-оптимизированная последовательность гена Cas9 Streptococcus pyogenes, еще один сигнал внутриклеточной локализации в ядре 3’-SV40 NLS, в качестве терминатора транскрипции использован синтетический полиА сигнал, и вектор экспрессии, представляющий собой вирусную частицу аденоассоциированного вируса (AAV), имеющую капсидные белки AAV, в которую упакована в качестве генома одноцепочечная молекула ДНК, на концах которой располагаются ITR AAV, внутри последовательно располагается эукариотический промотор полимеразы III - U6, после которого располагается кассета экспрессии РНК гида, включающая последовательность РНК-гида в формате crRNA, представляющую последовательность в 20 нуклеотидов, комплементарную таргетируемому локусу, сшитую с последовательностью trackRNA, область гомологии с локусом человеческого генома AAVS1 - левое гомологичное плечо, кассета экспрессии траснгена: промотор EFS-NS, под которым расположена белок-кодирующая последовательность гена hCYP21A2 на 78-99% идентичная последовательности SEQ ID NO: 3, терминатор транскрипции - полиА сигнал, область гомологии с локусом человеческого генома AAVS1 - правое гомологичное плечо. Изобретение расширяет арсенал средств для экспрессии 21-гидроксилазы в клетках млекопитающих. 7 з.п. ф-лы, 3 ил., 4 табл., 4 пр.