ИСТИНА

Изобретение относится к биохимии. Описан способ выявления мутации G250E киназного домена BCR-ABL у больных хроническим миелоидным лейкозом (ХМЛ). Заявляемый способ включает постановку полимеразной цепной реакции в реальном времени с использованием кДНК, полученной способом обратной транскрипции из РНК, выделенной из образцов крови больных хроническим миелоидным лейкозом, резистентных к ингибиторам тирозинкиназ первого поколения. В качестве праймеров используют систему, состоящую из прямого праймера SEQ ID NO: 1 и обратного специфического праймера на мутацию SEQ ID NO: 2. Для количественного определения мутации G250E используют специфический зонд, SEQ ID NO: 3. Число копий BCR-ABLG250E в образцах определяют по калибровочной кривой. Для определения общей экспрессии BCR-ABL используют систему, состоящую из прямого праймера, SEQ ID NO: 4, обратного праймера, SEQ ID NO: 5, и специфического зонда SEQ ID NO: 6. Для определения экспрессии контрольного гена ABL используют систему, состоящую из прямого праймера, SEQ ID NO: 7, обратного праймера, SEQ ID NO: 8, и специфического зонда SEQ ID NO: 9. Экспрессию BCR-ABLG250E вычисляют относительно общей экспрессии BCR-ABL и контрольного гена ABL по формуле: (Q BCR-ABLG250E cp./Q ABL ср.) / (Q BCR-ABL cp./Q ABL cp.)*100%. Способ позволяет повысить чувствительность и специфичность определения количества мутантного клона и сократить время исследования.