ИСТИНА

Изобретение относится к области медицины, а именно к клинической фармакологии и может быть использовано для количественного определения леводопы (3-гидрокси-L-тирозина) в плазме крови для решения задач лекарственного мониторинга при лечении пациентов, страдающих болезнью Паркинсона.Создан способ определения леводопы в плазме крови, включающий анализ крови на его наличие путем очистки плазмы крови, проведения хроматомасс-спектрометрии с использованием матрицы в виде плазмы крови с леводопой и внутреннего стандарта, вещества, близкого по строению молекулы к анализируемому веществу - метилдопы, при этом разделение продуктов экстракции проводят на обращённо-фазной хроматографической колонке, а в качестве элюента применяют муравьиную кислоту и ацетонитрил с последующим расчетом концентрации леводопы.При этом очистку проводят методом твердофазной экстракции на активированном оксиде аллюминия, образовавшуюся смесь встряхивают в течение 5 минут на вортекс-миксере, а затем центрифугируют на скорости 3500 об/мин для осаждения взвеси оксида аллюминия. надосадочную жидкость осторожно декантируют и отбрасывают, а осадок двукратно промывают деионизированной водой, разделение продуктов экстракции проводят на обращённо-фазной хроматографической колонке 4,6×250 мм c фенилгексилом в качестве неподвижной фазы, содержащий гексильный с 6-ю атомами углерода в цепи линкер, соединяющий фенильную группу с поверхностью силикагеля, при этом в качестве элюента применяют 0,1% водный раствор муравьиной кислоты - раствор А и ацетонитрил с добавлением 0,1% муравьиной кислоты – раствор Б, взятых в процентном соотношении раствора А к раствору Б 85:15 соответственно, с температурой разделения 35°С, и скоростью подачи элюента 0,8 мл/мин, детектирование леводопы проводят по суммарному ионному току дочерних ионов в диапазоне от 70 до 200 а.е.м., образующихся в результате фрагментации родительского молекулярного иона леводопы с m/z 198.1, а его концентрацию рассчитывают по формуле: С = 4,384714×AR, где С – концентрация леводопы (мкг/мл), AR – отношение площади хроматографического пика леводопы к площади пика внутреннего стандарта.Способ обладает высокой воспроизводимостью и точностью определения леводопы в плазме крови и наиболее пригоден для решения задач экспериментальной и клинической фармакокинетики