ИСТИНА

В ходе данной работы впервые показано, что транспортный белок ТБГ1 гордеивируса ПЛВМ, слитый с зеленым флуоресцентным белком, способен локализоваться в ядрышке эпидермальных клеток N. benthamiana при индивидуальной экспрессии (в отсутствии других вирусных белков). Участки белка ТБГ1, необходимые для его локализации в ядре и ядрышке (предполагаемые NLS и NoLS), выявлены в составе положительно заряженных кластеров неупорядоченного N-концевого домена белка ТБГ1 (NTD). Показано, что рекомбинантный белок ТБГ1 ПЛВМ способен взаимодействовать in vitro c белком ядрышка фибрилларином (AtFib2 из Arabidopsis thaliana) и белком телец Кахаля коилином (Atcoilin из Arabidopsis thaliana). Определены участки, отвечающие за взаимодействия белков. С помощью метода бимолекулярной флуоресцентной комплементации продемонстрировано взаимодействие вирусного белка и белков ядрышка и телец Кахаля in vivo и выявлена субклеточная локализация белковых комплексов в растительной клетке. В ходе исследования показано, что во взаимодействиях транспортного белка ТБГ1 и ядра определяющую роль играет неструктурированный домен NTD, в составе которого расположены как участки, необходимые для локализации вирусного белка в ядре/ядрышке, так и участки взаимодействия с фибрилларином и коилином. Полученные результаты впервые на модели гордеивирусов демонстрируют связь между ядром клетки и цитоплазматическим РНК-содержащим гордеивирусом, что свидетельствует в пользу участия ядра/ядрышка в инфекции растений гордеивирусами. Высказано предположение о биологической роли локализации транспортного белка ТБГ1 в ядрышке клетки для осуществления дальнего транспорта гордеивируса.