ИСТИНА

Целью данной работы стало исследовать временное и пространственное распределение продуктов гена germes в овариальном фолликулогенезе X. laevis.Предмет работы - исследование продуктов гена germes в оогенезе и раннем развитии шпорцевой лягушки, а также их распространенности среди других амфибий.Основной объект исследования - шпорцевая лягушка Xenopus laevis (Daudin), в исследовании распространенности гена среди других амфибий использовали: Silurana (Xenopus) tropicalis, Bufo Bufo, Rana temporaria; Bombina bombina, Hymenochirus boettgeri. Для решения поставленных задач использовались методы молекулярного клонирования, анализа экспрессии гена (РВ-ПЦР, in situ гибридизация, вестерн-блоттинг, иммуноцитохимия). Были получены следующие результаты: 1. мРНК germes присутствует на протяжении всего оогенеза, а после оплодотворения быстро деградирует, тогда как белок Germes выявляется на всех стадиях раннего развития вплоть до хвостовой почки. мРНК и белок Germes в оогенезе локализованы схожим образом, а в онтогенезе в половой плазме и первичных половых клетках остается только белок. 2. В 3´НТО мРНК germes идентифицированы мотивы локализации в митохондриальное облако и на вегетативный полюс ооцита; Белок Germes содержит мотивы лейциновых молний и миристоилирования, определяющие белок-белковые взаимодействия и локализацию как в ооците, так и в фолликулярных клетках. 3. мРНК germes, в том числе ее несплайсированная форма, выявляется в фолликулярных клетках. В фолликулярных клетках белок Germes локализован в местах их клеточных контактов, а также области макровиллей. 4. Ген germes идентифицирован только у видов внутри семейства Pipidae – Xenopus laevis, Xenopus borealis, Xenopus tropicalis и Hymenochirus boettgeri, но не определяется в геноме Pseudhymenochirus merlini.