ИСТИНА

Диссертационная работа Бубнова Дмитрия Михайловича «Инструменты интеграции в геном Escherichia coli и других представителей порядка Enterobacteriales» посвящена проблеме интеграции синтетических последовательностей в геном микроорганизмов. Автором была создана стратегия селекции на основе репрессора транскрипции CI бактериофага λ и токсина Hok. Показано, что cI-hok превосходит все описанные в литературе маркеры негативной селекции, а его эффективность достигает предельно возможных значений. Показана возможность увеличения частоты интеграции неметилированных линейных конструкций в бактериальный геном в результате экспрессии ocr бактериофага T7. Показана возможность интеграции в произвольные локусы хромосомы синтетических конструкций длиной до 8 т.п.н. с помощью негативной селекции cI-hok и Ocr-опосредованной Red-рекомбинации. Показана эффективность этого подхода в работе с четырьмя микроорганизмами, принадлежащими к порядку Enterobacteriales.