ИСТИНА

ВЫВОДЫ 1. Получена линия клеток Neuro2а, стабильно гиперэкспрессирующая uPAR. С использованием технологии CRISPR/Cas9n получены клоны клеток Neuro2a с подавленной экспрессией uPAR или нокаутные по гену uPAR. 2. Активность uPAR опосредует направленный рост нейритов и выживаемость Neuro2a. Блокирование активности uPAR вызывает формирование нейритов и усиливает их ветвление, сопровождаемое повышением экспрессии RIT1 и МАР2 – белков, ответственных за ветвление аксонов. Длительное блокирование uPAR активирует киназы Akt (S473) и р38, снижает экспрессию маркера дифференцировки и выживаемости нейронов NeuN и приводит к гибели клеток по механизму деградации ДНК с участием белка PARP-1. 3. Экспрессия uPAR поддерживает дифференцировку и выживаемость Neuro2a. При нокауте uPAR снижается пролиферация Neuro2a и рост нейритов, что сопровождается снижением рERK1/2, ki67 (маркера пролиферации) и активацией апоптоза (каспаза-3 и белок PARP-1). 21 4. uPAR определяет активацию сигнализации с участием EGFR и ERK1/2 и механизмы клеточного ответа Neuro2a. Экспрессия и активность uPAR вызывает фосфорилирование EGFR и ERK1/2 и стимулирует рост нейритов. При подавлении активности uPAR или нокауте uPAR уменьшается содержание активных форм EGFR и ERK1/2 и падает выживаемость клеток. 5. Нокаут uPAR снижает содержание мРНК полноразмерного TrkC и его посредника pAkt (Т308).