ИСТИНА

В первой половине 90-х исследования, касающиеся поиска и анализа полиморфизма вариабельных участков генома человека, достигли наибольшего размаха и интенсивности. Это позволило создать несколько поколений подробных генетических карт с более или менее равномерным распределением по всей хромосоме высокополиморфных маркеров, причем плотность последних на карте возрастала от поколения к поколению, Полиморфные маркеры нашли быстрое применение в геномном картировании, позволяя привязать к себе локализованные по соседству гены и упорядочить их взаимное расположение на хромосоме. Использование таких маркеров придало еще больший размах широкомасштабным исследованиям по расшифровке генома человека, которые к настоящему времени уже близки к своему завершению. Полиморфные локусы также привлекли к себе активное внимание со стороны судебных медиков и биохимиков, занятых биологической экспертизой. Имеющиеся к моменту внедрения ДНК-анализа (середина 80-х годов) идентификационные системы были основаны на существовании множественных форм белков (изоферментный анализ) и обладали недостаточной разрешающей способностью. Использование полиморфных локусов ДНК позволило резко повысить разрешающую силу и мощность идентификационного анализа и получило самое широкое распространение в судебно-медицинской практике. Однако не каждый вариабельный локус в равной степени пригоден для идентификации личности на уровне ДНК. В геномной дактилоскопии обычно используют мультиаллельные локусы, отличающиеся высоким уровнем полиморфизма и информативности и, следовательно, обладающие существенной разрешающей силой. Аллели таких локусов должны эффективно и с равной интенсивностью амплифицироваться на деградированной ДНК и при наличии очень малых количеств последней, не обнаруживая при этом чересчур сложной гетерогенности по размеру и межаллельной вариабельности - факторов, сильно затрудняющих точность генотипирования. Подобные жесткие критерии не относятся к полиморфным локусам, применяемым в генетическом анализе наследственных заболеваний. Здесь используются разнообразные маркеры нескольких типов, расположенные как внутри, так и между генами. Генетический анализ с использованием вариабельных локусов подразделяется на ассоциативный и семейный (анализ сцепления). При ассоциативном анализе сравнивают распределение частот аллелей и генотипов полиморфного маркера, расположенного внутри или рядом с кандидатным геном, в группах больных и здоровых доноров. Наличие достоверных различий в распределении свидетельствует об ассоциации полиморфного маркера с заболеванием. При этом внутригенные маркеры имеют предпочтение перед межгенными, т.к. в их случае обнаружение ассоциации однозначно указывает на связь конкретного гена с изучаемой патологией. В анализе сцепления преимущественно используются монолокусные повторы (мини- и микросателлиты), находящиеся внутри генов и по соседству с ними. Установление ассоциации и сцепленности гена с заболеванием имеет важное значение для разработки мер по профилактике и лечению данной патологии, дифференцированного подхода при подборе лекарственных препаратов (ингибиторы, блокаторы, стимуляторы), действующих на белковый продукт данного гена (фермент, рецептор), для пациентов в зависимости от их генотипа, формированию групп риска и прочее. Особое значение это имеет в случае таких комплексных заболеваний, как сахарный диабет и диабетические осложнения, сердечно-сосудистые и аутоиммунные нарушения и прежде всего по причине повсеместного распространения данных патологий и существенного характера наносимого ими социальноэкономического вреда. В настоящем исследовании нами рассмотрены два аспекта применения полиморфных маркеров - это геномная дактилоскопия (разработка тест-системы для идентификации личности и определения спорного отцовства на территории РФ) и ассоциативный анализ ряда мультигенных заболеваний (сахарный диабет и его сосудистые осложнения, Базедова болезнь, сердечнососудистые нарушения) в московской популяции.