ИСТИНА

Разработан способ получения остеоиндуктивных остеопластических материалов на основе деминерализованного костного матрикса, в том числе, содержащих иммобилизированный рекомбинантный костный морфогенетический белок 2 человека (rhBMP-2). На адаптированных моделях оценки регенеративного потенциала in vivo на лабораторных животных (крысы, кролики) экспериментально доказаны остеоиндуктивные, остеоинтегративные и ангиогенные свойства разработанных материалов при применении их как в самостоятельном виде (модель индукции эктопического остеогенеза, модель регенерации краниальных дефектов критического размера), так и в сочетании с металлоконструкциями из титана. Показано, что максимально выраженными свойствами обладают материалы с добавлением rhBMP-2. Получен новый штамм E. coli M15 [pREP4, pBMPRIA-CBD], обеспечивающий продукцию рекомбинантного химерного белка BMPRIA-CBD, состоящего из рецептора BMPRIA фактора роста костной ткани BMP-2, соединенного с целлюлозосвязывающим доменом из Caldicellulosiruptor bescii. Оптимизация условий культивирования штамма-продуцента позволила обеспечить синтез BMPRIA-CBD на уровне 30% от всех белков штамма. Разработан подход для обогащения препаратов rhBMP-2 биологически активной димерной формой белка с помощью аффинной хроматографии на целлюлозном сорбенте с иммобилизированным рекомбинантным белком BMPRIA-CBD. Подтверждена биологическая активность и установлено позитивное дозозависимое влияние очищенных по разработанной методике препаратов rhBMP-2 в димерной форме на синтез щелочной фосфатазы в культуре эукариотических клеток С2С12, пролиферацию и остеогенную дифференцировку МСК костного мозга и селезенки мышей, а также супрессирующее действие на макрофаги, выражающееся в снижении их числа от 2,5 до 6,4 раз в зависимости от концентрации белка.