Аннотация:Благодаря своему активному развитию и актуальности решаемых проблем, регенеративная медицина притягивает к себе в настоящее время все больший интерес научного сообщества. Эта наука ставит перед собой целью восстановление тканей и органов и включает в себя клеточную терапию и тканевую инженерию.
Перспективным объектом в этой области являются мезенхимные стромальные клетки жировой ткани (МСК ЖТ). Данная клеточная линия, происходящая из жировой ткани, характеризуются высокой паракринной активностью и способностью к дифференцировке в хондрогенном, адипоцитарном и остеогенном направлениях. Кроме того, немаловажным свойством МСК ЖТ является их доступность. Благодаря упомянутым особенностям, МСК ЖТ являются перспективным материалом для стимуляции регенерации и ангиогенеза in situ.
Несмотря на указанные достоинства клеток, клинические исследования, в которых производились инъекции суспензии МСК ЖТ, показали низкую эффективность. Предполагаемой причиной может служить низкая выживаемость клеток при аппликации в виде суспензии. Это происходит, во-первых, из-за самого нахождения клеток в суспензии, когда происходит аноикис – апоптоз клеток в ответ на потерю взаимодействия с микроокружением (внеклеточным матриксом и клетками). Во-вторых, свое влияние оказывает механический фактор: гибель клеток – следствие повреждения. Она происходит при введении, когда клетки проходят через узкую по диаметру иглу.
Высказывается предположение о том, что вышеперечисленных проблем можно избежать, применив альтернативный метод доставки клеток. Предлагается использовать трансплантацию тканеинженерных конструктов – клеточных пластов, состоящих из МСК ЖТ и наработанного ими клеточного матрикса.
Помимо сложностей при введении, все большую актуальность набирает проблема возникновения иммунологических реакций. Это легко объяснимо, ведь введение МСК ЖТ представляет собой ничто иное как аллогенную трансплантацию, которая может спровоцировать иммунную реакции организма.
Цель: разработка метода сборки и мобилизации снятием с культурального пластика клеточных пластов из МСК ЖТ мыши и человека.
Задачи: 1) Определить оптимальное количество клеток, при котором после отделения от пластика клеточный пласт остается интактным и пригоден для манипуляций. Разработать технику наименее инвазивного снятия клеточных пластов с пластика.
2) Проанализировать паракринную активность клеточного пласта из МСК ЖТ и сравнить ее с аналогичной у монослоя клеток.
3) Произвести децеллюляризацию полученных конструктов и оценить ее результаты с применением гистологического окрашивания.