Аннотация:Бактерии широко используют в биотехнологических процессах. К числу таковых относится применение пурпурных бактерий для очистки сточных вод, в животноводстве и в других целях. Так же ведутся разработки в области биосинтеза аммиака, благодаря способности бактерии к азотфиксации с выделением в среду ионов аммония [1].
Объектом нашего исследования является Rhodobacter sphaeroides – пурпурная грамотрицательная палочковидная бактерия. У нее обнаружено большое разнообразие метаболических путей, связанных с получением энергии в зависимости от условий существования [2]. За счет наличия фотосистемы эти бактерии способны к аноксигенному фотосинтезу, при этом донором электронов могут служить простые органические (фотогетеротрофный рост) и неорганические соединения (фотоавтотрофный рост) [3]. Так же бактерии способны расти в темноте в микроаэробных или аэробных условиях, получая энергию в процессе дыхания, используя в качестве субстрата органические соединения (простые органические кислоты). В анаэробных условиях способны к хемоавтотрофии.
Целью работы является изучение клеточного роста в стандартных лабораторных условиях, а также исследование влияния 6S РНК на рост в обычных и стрессовых условиях.
6S РНК – малая некодирующая РНК, которая благодаря своей вторичной структуре связывается с РНК полимеразой и ингибирует транскрипцию [4]. Ее роль изучают путем сравнения роста клеточных культур дикого и мутантного (без 6S РНК) типов в различных условиях. Кривые клеточного роста получают с помощью измерения оптической плотности, зависящей от числа бактерий.
В ходе работы клетки дикого типа выращивались в аэробных, анаэробных, фототрофных и микроаэробных условиях. В ходе эксперимента были обнаружены значительно большие скорость роста и конечная плотность для клеточной культуры, выращиваемой в аэробнах и микроаэробных условиях, по сравнению с анаэробными условиями. Рост в фототрофных условиях отличается меньшей скоростью увеличения культуры, но большей конечной плотностью. Влияние 6S РНК в данных условиях роста выявлено не было. В условиях солевого стресса было обнаружено значительное отклонение кривой роста, соответствующей мутантному штамму, от кривых для дикого типа. Это говорит о том, что функция 6S РНК может заключаться в адаптации клеток к выбранным условиям. Эта гипотеза представляет собой перспективу дальнейшего исследования.
Литература
1. Кондратьева Е.Н. Фототрофные микроорганизмы. / Е.Н. Кондратьева, И.В.Максимов, В.Д. Самуилов. - М . : Изд-во Московского ун-та, 1989. - 376 с.
2. Кондратьева Е.Н. Автотрофные прокариоты. / Е.Н. Кондратьева. - М. :Изд-во Московского ун-та, 1996. - 312 с.
3. Ивановский Р.Н. Механизм ассимиляции ацетата у пурпурной несерной бактерии Rhodospirillun rubrum, не имеющей изоцитратлиазы. / Р.Н.Ивановский, Е.Н.Красильникова, И.А. Берг // Микробиология. - 1997. - Т. 66, № 6. - С. 744-749.
4. Elkina D., Weber L., Lechner M., Burenina O., Weisert A., Kubareva E. Klug G. 6S RNA in Rhodobacter sphaeroides: 6S RNA and pRNA transcript levels peak in late exponential phase and gene deletion causes a high salt stress phenotype. / RNA Biology, 1627–1637. (2017).