Аннотация:Ранее в нашей лаборатории был охарактеризован новый проапоптотический ген
дрожжей S. cerevisiae YDR326C, названый нами YSP2 (Yeast Suicidal Protein). Было показано,что нарушение ysp2 приводит к многократному увеличению устойчивости клеток к действию таких индукторов програмируемой смерти дрожжей как ацетат, перекись водорода и амиодарона, и снижению устойчивости к тепловому стрессу. При этом в клетках с делецией ysp2 мы наблюдали существенное изменение характерной для програмируемой смерти дрожжей митохондриальной динамики, а именно: в клетках ysp2 митохондрии значительно дольше не подвергались фрагментации, кроме того образовывались митохондрии с
фрагментированной внутреней мембраной при нефрагментированной наружней. Однако в
обычных условиях ни нарушение, ни сверхэкспрессия YSP2 не приводили к видимым
нарушениям митохондриальной динамики. Кроме того делеция ysp2 не влияла на DNM1
(динаминоподобная ГТФаза ключевой белок для фрагментации митохондрий) зависимую
фрагментацию митохондрий. Двойная делеция Δysp2Δdnm1 обладает повышенной
устойчивостью к ацетату и амиодарону, чем одиночные делеции Δysp2 или Δdnm1.
Недавно было обнаруженно, что белок Ysp2p и другой ранее охарактеризованный
нами как проапоптотический белок Ysp1p содержат VASt домен который был обнаружен в
452 белках различных филогенетических групп и который предположительно имеет
проапоптотическую функцию и способен транспортировать липиды, например эргостерол.
Мы предположили, что белки Ysp1p и Ysp2p участвуют в митохондриальной динамике,
регулируя липидный состав митохондриальных мембран. Для проверки данного
предположения мы планируем сравнить локализацию и динамику Dnm1p-GFP в клетках
Δysp1Δysp2 и дикого типа. В случае обнаружения эффекта, выделить митохондрии и сравнить содержание эргостерола во внутреней инаружней митохондриальных мембранах клетках Δysp1Δysp2 и дикого типа.
Целью данной работы является исследование влияния генов YSP2 и YSP1 на
митохондриальную динамику S. cerevisiae.