|
ИСТИНА |
Войти в систему Регистрация |
Интеллектуальная Система Тематического Исследования НАукометрических данных |
||
Определение гидропероксидов фосфолипидов методом хемилюминометриидипломная работа (Специалист)
- Научные руководители: Созарукова М.М., Проскурнин М.А., Проскурнина Е.В.
- Автор: Камионская М.В.
- Тип: Специалист
- Организация, в которой проходила защита: МГУ имени М.В. Ломоносова
- Год защиты: 2023
- Аннотация: Цель работы: оценка аналитических возможностей и подбор условий определения гидропероксидов фосфолипидов методом хемилюминометрии. Актуальность работы и практическая значимость: Гидропероксиды фосфолипидов (PL-OOH) — одни из ключевых биомаркеров окислительного стресса. Поскольку окислительный стресс, как известно, лежит в основе многих патологий, определение PL-OOH является актуальной и практически значимой задачей для медицинской науки и практики. Для определения PL-OOH целесообразно использовать доступные, чувствительные и точные методы, такие как люминесцентные (фото- и хемилюминесцентные). Для оценки окислительного стресса предлагается использовать суммарное содержание функционально активных PL-OOH, участвующих в перекисном окислении фосфолипидов (ПОФЛ), индуцированном основным гемопротеином крови — гемоглобином. Основные выводы работы: 1. Изучена возможность применения Hb как индуктора ПОФЛ для определения их гидропероксидов; подобраны рабочие условия, получены уравнения градуировочных зависимостей светосуммы (площади под хемилюминесцентной кривой за определенный промежуток времени) от концентраций Hb для систем с кумарином 334 (Cum 334) в качестве активатора хемилюминесценции и гидропероксидами (фосфо)липидов: (L-OOH, PC-OOH, CL-OOH, PS-OOH). Оценены метрологические характеристики определения Hb, пределы определения на уровне 4–8 нмоль/л в зависимости от фосфолипида. 2. Изучена система при варьировании субстратов — гидропероксидов фосфолипидов (L-OOH, PC-OOH, CL-OOH, PS-OOH) — в системе с Hb; получены уравнения градуировочных зависимостей светосуммы (площади под хемилюминесцентной кривой за определенный промежуток времени) от концентраций гидропероксида фосфолипида (PL-OOH) для систем с Cum 334 в качестве активатора хемилюминесценции и Hb в качестве индуктора. Оценены метрологические характеристики определения PL-OOH, пределы определения на уровне 13 – 36 мкмоль/л в зависимости от фосфолипида. 3. Проведен анализ реальных объектов — культуры клеток MCF-7, ФЛЭЧ, 1321 глиома, HEK293T после воздействия различных доз УФ-облучения — в системе с Hb и Cum 334; определено содержание гидропероксида фосфатидилсерина в культурах клеток глиомы 1321 и HEK293T. 4. Разработанная хемилюминесцентная кинетическая индикаторная система на основе дезоксигемоглобина, гидропероксида фосфатидилхолина и кумарина 334 применена в обратном варианте: для определения антиоксидантов, ресвератрола и кверцетина. Показано, что концентрации полуподавления перекисного окисления фосфатидилхолина составляют (1.35 ± 0.02) мкМ и (1.60 ± 0.03) мкМ для ресвератрола и кверцетина, соответственно, то есть они обладают сопоставимой антиоксидантной активностью.
- Добавил в систему: Созарукова Мадина Магамедовна