|
ИСТИНА |
Войти в систему Регистрация |
Интеллектуальная Система Тематического Исследования НАукометрических данных |
||
Изучение взаимодействия глицеральдегид-3-фосфатдегидрогеназы человека с α-синуклеиномдипломная работа (Магистр)
- Научный руководитель: Шмальгаузен Е.В.
- Автор: Хомякова Е.В.,
- Тип: Магистр
- Организация, в которой проходила защита: МГУ имени М.В. Ломоносова
- Год защиты: 2017
- Аннотация: 1. Из экстракта клеток-продуцентов выделена рекомбинантная глицеральдегид-3-фосфатдегидрогеназа человека (hGAPD) без дополнительных мотивов с кинетическими параметрами близкими к параметрам нативных белков млекопитающих и с удельной активностью 115±7 мкмоль NADH/мин*мг, в несколько раз превышающей активность полученных в других лабораториях рекомбинантных hGAPD. 2. Методом кислотного осаждения из экстракта клеток-продуцентов выделен рекомбинантный α-синуклеин человека без дополнительных мотивов. 3. Впервые показано, что взаимодействия hGAPD с α-синуклеином приводит к инактивации фермента, причем степень инактивации hGAPD возрастает при повышении концентрации α-синуклеина. 4. Методами иммунопреципитации и твердофазного иммуноферментного анализа было подтверждено связывание α-синуклеина с hGAPD. 5. Взаимодействие hGAPD и α-синуклеина, а также инактивация фермента, наблюдается в растворах при физиологических значениях ионной силы. При этом добавление кофактора фермента - NAD+ - снижает степень ингибирования фермента α-синуклеином, а частичное окисление SH-групп активного центра hGAPD стимулирует инактивацию. 6. Методом динамического лазерного светорассеяния показано, что при взаимодействии hGAPD и α-синуклеина при 22 °С не происходит ни агрегации, ни диссоциации фермента на димеры. При этом связывание hGAPD с α-синуклеином снижает температуру начала тепловой агрегации фермента примерно на 4°С .
- Добавил в систему: Шмальгаузен Елена Викторовна